应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗？ 求指点 谢谢~
51/1返回列表
查看: 1683  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

think-edge

金虫 (小有名气)

[交流] 大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗？ 求指点 谢谢~ 已有4人参与

 http://\"大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗？  求指点  谢谢~\"
我没有用Clontech的Advantage 2 PCR kit，而是用用了takara的primerstar进行了“LD-PCR”，延伸时间7min（+5s each cycle），25个循环，结果如图示，没有经验，不知道是不是没有扩增成功啊？  求指定 1和2为样品扩增副孔，貌似smear条带与阳性对照相比弱好多，这个怎么解决？  可以用于下一步纯化，然后与线性化的rec载体共转酵母Y187吗？  

谢谢~  祝好！

 http://\"大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗？  求指点  谢谢~-1\"
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-10-28 10:50:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by think-edge at 2014-10-28 10:53:02
http://image.keyan.cc/data/bcs/2014/1028/w98h1229923_1414464747_973.jpg


LD-PCR.jpg

你那个合成的量肯定不够的，加几个循环试试

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-11-10 10:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

think-edge

金虫 (小有名气)
http://image.keyan.cc/data/bcs/2 ... _1414464747_973.jpg

大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗？  求指点  谢谢~-2
LD-PCR.jpg
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-28 10:53:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

think-edge

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-11-10 10:01:16
你那个合成的量肯定不够的，加几个循环试试
...

嗯  谢谢您  我已经买了clontech的advantage重新扩增了   现在纯化后有2.5ug   打算拿这个建库

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-10 12:56:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meng蓝色桃子

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by think-edge at 2014-11-10 12:56:30
嗯  谢谢您  我已经买了clontech的advantage重新扩增了   现在纯化后有2.5ug   打算拿这个建库
...

你好，请问你的库构建好了吗？我的LD-PCR产物过柱纯化后就没了，请问你知道是什么原因吗，困惑许久了，谢谢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2017-04-15 07:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[职场人生] 40+中年人失业后，还能找到好工作吗？ +11 xqy2009 2026-10-13 13/650 2026-10-15 21:32 by bear2007
[有机交流] 用NBS溴化时溶剂除了CCl4外还有什么 +3 18834002860 2026-10-12 6/300 2026-10-15 14:30 by 长沙摩尔信息科�
[基金申请] 申请科研项目纯靠实力能成功吗？ 200+7 David1982 2026-10-13 11/550 2026-10-15 10:30 by zyqchem
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +11 Isak0320 2026-10-12 15/750 2026-10-14 21:55 by 猫鱼不是鱼
[论文投稿] 二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores 10+3 纳斯达克ML 2026-10-11 4/200 2026-10-14 17:30 by babero
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +8 wangyl_123 2026-10-10 13/650 2026-10-14 15:12 by zuesli
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭