求助各位虫友们，我的毕赤酵母GS115+载体ppic9k，蛋白大小不到20kD，前面的步骤都做的没问题，也进过核酸电泳验证过了，可是到了蛋白表达这一步，就是不表达…

跑蛋白电泳

1，浓度太低，直接跑基本没东西。试过TCA和PEG浓缩之后，条带与空白对照没有相应条带。

2，经过镍柱纯化之后基本没有了…这样应该就是没有表达出来了。也用考马斯检测的试了一下，基本蓝色程度很低，说明蛋白不多。

基本新手，实验室没有人做过相应的内容，问了很多朋友，但是做的东西不太一样，想请教一下朋友们这下要怎么办呢，感激不尽

ps：调整pH的方法还在做，周期较长，换菌种载体什么的也不太清楚是否可以表达…

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