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关于考马斯亮蓝法测蛋白标准曲线

作者 泥鱼山
来源: 小木虫 300 6 举报帖子
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我用的考马斯亮蓝G250,
称取100mg溶于50ml 95%乙醇,再加入100ml 85%磷酸,定容至1L,但是颜色是绿色的。

蛋白溶液用的是牛血清蛋白
称取100mg,定容至100ml

吸光度595nm值都在2以上,用的是分光光度计。

我看文献吸光度值在0.5左右,是哪里出问题了嘛?

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  • 精华评论
  • fuyuandj86

    过滤了吗?

  • 491468278

    待测样品有表活或有机溶剂吗?

  • fuyuandj86

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 泥鱼山 at 2021-05-30 22:36:25
    有真空抽滤
    ...

    用甲醇溶解以后就过滤,不要稀释定容后再过滤。定容后再过滤就容易配出来是绿色的

  • 超微

    我测的100微克/ml的BSA溶液吸光度是0.5左右,1mg/ml的浓度是不太大了。
    我配的G250没出现过绿色。。不知道为啥会出现绿色。但是发现酸性溶液可能会使得染色液变成绿色

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