EXPAR指数扩增的问题~各位多多帮忙
为什么荧光定量结果表明没有扩增呢？
我的靶引物和模板浓度为0.1μM，是不是有点低啊。体系为20μL
还有就是模板的3端是否需要P修饰呢，我看有的文献修饰，有的没有。
救救孩子吧
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质粒模板么，浓度多高？
试剂是买的自己配，还是预混试剂直接用的？
不是质粒，就是自己设计合成的单链DNA，终浓度为0.1μM，试剂是自己混的
如果是根据PNAS那篇文章里面提到的有: (1) nickase, (2)聚合酶, (3)引物或者靶标序列内含有切口没识别序列, (4)反应条件(buffer,尤其镁离子浓度, 盐浓度, pH值等), 一个个排除吧
自己混的试剂,没有对比试剂,摸索会麻烦一下,good luck!
谢谢~已经扩出来啦嘻嘻嘻
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