pET32a纯化有很多杂蛋白，要怎么改进呢
楼主用pET32a表达酶，但是镍柱纯化发现有很多杂蛋白，尝试了不同梯度的洗脱都没有改进。
会不会是pET32a载体的结构有影响？his tag是在trx tag 后面的，这样会影响纯化效果吗？
有大佬可以解答下吗？？？
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可以尝试下离子交换
镍柱纯化效果一般不太好。要想效果好，可以在另外一端加一个strep tag II。双标签纯化。
我后面还用MBP融合表达目的基因，是不是也可以再利用MBP再纯一遍
，
可以的。MBP纯化效果非常好。纯度很高。竟然有MBP标签，其实你没必要用Ni纯化了。
嗯嗯，感谢指点！
我也是用32a表达蛋白能加微信吗