Cas12a-crRNA复合体切割荧光报告分子，最后体系中的荧光强度也太不稳定了，求助是哪里出了问题？
具体过程就是先核算恒温扩增，然后cas12a-crRNA复合体识别扩增产物并切割荧光报告分子。
操作在冰上进行，已经尽量控制每管的扩增时间和切割时间相同了。而且我是把其他试剂先混合后再分装与靶标核酸孵育反应的。
最后用qPCR仪测荧光，每次差距都特别大。我做了好多次，取其中最接近的三次结果做了误差棒，如图，还是很差。求助这是怎么回事儿啊？

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