我做的重组质粒,把1000bp的基因片段连接到5.3kb的pet26b载体上,转化到Origami2大肠杆菌感受态细胞,用的加了抗生素的LB平板,不长菌是怎么回事呀?做了对照:空载体直接转化,涂到抗生素平板,也是不长菌;但是涂到没加抗生素的平板上长了一堆密密麻麻的小菌落,到底咋回事呀? 返回小木虫查看更多
是不是抗性弄错了呀
时间放长一点。一般来说大肠杆菌8到10个小时菌斑就很大了,但是有的基因转化进去后会导致菌落生长缓慢。我当年有个基因构建载体到大肠杆菌感受态后,需要3~5天才能长出正常大小的菌斑,当时一度以为是杂菌,构建了2个月,后来发现就是这么慢,导致开始生长缓慢觉得平板上完全没有生长,
你要不就用卡那单抗试试?还是已经试过了也没长....
化转后重旋的菌液分开涂两个单抗板,筛下哪个板有问题?
是不是抗性弄错了呀
时间放长一点。一般来说大肠杆菌8到10个小时菌斑就很大了,但是有的基因转化进去后会导致菌落生长缓慢。我当年有个基因构建载体到大肠杆菌感受态后,需要3~5天才能长出正常大小的菌斑,当时一度以为是杂菌,构建了2个月,后来发现就是这么慢,导致开始生长缓慢觉得平板上完全没有生长,
你要不就用卡那单抗试试?还是已经试过了也没长....
化转后重旋的菌液分开涂两个单抗板,筛下哪个板有问题?