这是我用分析型hplc的条件 ：
柱子 是非极性C18 150×2.1mm×5μm, GRACE

自由相：
A相：水/甲醇/TFA 80/20/0.1
B相：甲醇 100%

梯度：
时间        B相
0.01        20
2             20
16           90
21           90
31           20

流速 0.2 ml/min，30度

在准备上半制备型hplc前，导师让我先优化分析型hplc的梯度来提高分离度，就是下图中10-20分钟之间的产物的峰，
因为是第一次用，导师也不教。。真的毫无头绪，求赐教

另外导师给我的前人用的半制备hplc的条件和分析型的几乎不一样：
A相是 水/甲酸  100/0.1
B相是 乙腈/甲酸  100/0.1
梯度是
时间        B相
0.01        10
2             10
80           66
85           99
90           10
柱子是 GRACE Apollo C18 (250 x 22 mm, 5 μm)
流速是10 ml/min， 4 % p/v入样

那我优化了分析型hplc的条件，对半制备hplc的条件有什么帮助吗。。。为什么不直接用还要先优化分析型hplc的。
还有。。应该怎么入手改变梯度来优化。。TT 谢谢大家！


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