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纯化蛋白做蛋白质结晶

作者 mircoakk
来源: 小木虫 550 11 举报帖子
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找公司纯化了一批蛋白,拿到的蛋白储存在不同的溶液中。第一种是,50mM NaHCO3,150mM NaCl,10%的甘油,0.5M L-精氨酸,PH 10;第二种是,50mM Tris-HCl,150mM NaCl,10%的甘油,0.5M L-精氨酸,PH 8;第三种是,50mM Tris-HCl,150mM NaCl,10%的甘油,PH 8。请问,这三种溶液体系,哪些物质对蛋白质的晶体结构会产生影响???谢谢大家

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  • 精华评论
  • CLAIREG

    第一种PH太高了,蛋白结构可能会变。

  • 一米吃苹果

    老实说,溶液中所有成分都会影响结晶的。。。建议选用成分最简单的,然后自己调整结晶条件

  • 一米吃苹果

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by mircoakk at 2018-03-27 19:07:54
    大神有什么量上面的建议呢?我完全不懂呢
    ...

    筛选晶体有很多商业KIT的呀

  • 一米吃苹果

    引用回帖:
    7楼: Originally posted by mircoakk at 2018-03-27 19:48:08
    刚拿到公司纯化的蛋白,浓度太低,还没开始做结晶实验。就想确定一下,公司给的蛋白储存液,对后续晶体结构分析有没有很大的影响。求大神赐教
    ...

    尽量储存液含的物质种类少,就含有缓冲剂和盐就好了嘛,最多再加点还原剂,搞那么多东西在里面干什么?蛋白表达需要的

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