去年评阅人建议增加植物体内蛋白互作结果,不太懂他指的什么,求帮助
本子就是写得A基因的功能,预定了几个可能有直接互作的蛋白B、C......,然后双突三突看表型,酵母双杂看互作,有个评阅人说体外互作的同时应该增加植物体内的蛋白互作结果,但是我真的不知道植物体内的蛋白互作除了突变体遗传分析,还能有什么呢?对蛋白层面技术了解有限,但是常用的BiFC、co-ip都是体外啊,不太懂这个意见是要我做什么?求助大家帮助,第3年了,还是想好好改改这个本子,今年不成准备换题目了.......
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我觉得他说的体内互作应该指的是CoIP,CoIP是体内的相互作用,一般认为pull down是体外的,酵母双杂交是半体内的
coIP BiFC
thanks
哦哦,有没有可能是瞬时荧光看蛋白共定位,感觉共定位不太能说明问题
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蛋白表达有时效性,这些体外的方法只能说明有互作的分子基础。。。有条件可以试试电镜