各位姐姐哥哥们好！

最近做一个蛋白的磷酸化检测遇到了问题，恳请各位有经验的姐姐哥哥指教。我的磷酸化抗体是找国外的一个实验室要的，他们自己做的抗体，用着挺好，条带250kDa左右，我用梯度胶跑的，有时候条带在350kDa左右，拖尾很严重但挺亮，而且很靠上感觉像是在胶孔的位置；有时候有一条很弱的带，也在350kDa左右，不拖尾。用了knockout细胞核总蛋白的抗体均表明抗出来的带是目的蛋白。为什么有时候拖尾有时候条带弱啊？

更让人郁闷的是复孔间差异挺大，开始觉得是自己操作问题，可是做了很多次，已经很注意了，复孔之间还是不齐，感觉不像是我操作的问题。有没有人遇到这种情况，求指教啊，这个western做了三个月了，课题卡这儿走不动了，着急伤心啊。。。。。 返回小木虫查看更多