做了内参和研究对象的qPCR标准曲线,接下来怎么确定我对照组和实验组每个孔各加多少cDNA合适呢? 我只是为了确定delta delta CT 返回小木虫查看更多
每个实验室的体系不太一样,和试剂也有关,你可以自己优化做适合的体系
10 - 100 ng,根据基因丰度而定。
楼主的实验样本要是同一批处理进行了提RNA反转录同样RNA样品的话,可以挑选其中一个反转录过后的cDNA样品做一个浓度的稀释梯度,先跑一遍看看内参基因的Ct值,选取合适的稀释浓度,进行实验即可,祝好运~~,
每个实验室的体系不太一样,和试剂也有关,你可以自己优化做适合的体系
10 - 100 ng,根据基因丰度而定。
楼主的实验样本要是同一批处理进行了提RNA反转录同样RNA样品的话,可以挑选其中一个反转录过后的cDNA样品做一个浓度的稀释梯度,先跑一遍看看内参基因的Ct值,选取合适的稀释浓度,进行实验即可,祝好运~~,