NotI和SacII酶切问题
最近一直在用notI和SacII酶切，然后连接表达载体，平板上总是没有任何东西，不知道什么原因，我是用SacII先酶切过夜，然后柱回收后用NotI再酶切2小时，跑胶后条带大小是对的，但一直都没有阳性菌落，请问有做过NotI和SacII双酶切的大神吗，你们是怎么切的啊，效果怎样啊，跪求指教。。。
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谢谢你的回复，我再试试看吧，希望能有个好的结果吧。。。