求助,求方法,怎么寻找黑曲霉所含有的未知酶类?
最近,老师给我了个毕设的课题,就是让我寻找黑曲霉的未知酶类,提取,并测其活性。
我也有好好思考过,自己大致思路是,提取黑曲霉的所有蛋白,通过跑SDS-PAGE可以分离蛋白质,并可测得蛋白质的分子量,然后,根据已知酶的分子量,排除条带上的已知酶,剩下的条带很有可能是未知酶,然后通过相关测定,找到,并鉴定未知酶。
问题来了,就是酶都是需要底物的,我不知道怎么设计相应的培养基,希望大家给予帮助啊! 返回小木虫查看更多
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最近,老师给我了个毕设的课题,就是让我寻找黑曲霉的未知酶类,提取,并测其活性。
我也有好好思考过,自己大致思路是,提取黑曲霉的所有蛋白,通过跑SDS-PAGE可以分离蛋白质,并可测得蛋白质的分子量,然后,根据已知酶的分子量,排除条带上的已知酶,剩下的条带很有可能是未知酶,然后通过相关测定,找到,并鉴定未知酶。
问题来了,就是酶都是需要底物的,我不知道怎么设计相应的培养基,希望大家给予帮助啊! 返回小木虫查看更多
MALDI-TOF-MS就可以搞定
谢谢,我在看看,不会的,再请教你哈
用霉菌的培养基就可,你又不研究培养基,只要能生长能产酶就可以
嗯,非常感谢啊,我之前理解错老师的意思了,我以为老师要让我寻找黑曲霉的未知酶系,但事实上老师想让我检测黑曲霉菌株能产生的水解酶,并测酶活 ,今天,我配的是产酶培养基,碳源是木聚糖,氮源是硫酸铵,还有麸皮
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