小木虫

当前位置：首页 > 有奖问答 >又是双酶切的问题

又是双酶切的问题

作者 junxiao0320: 来源: 小木虫 250 5 举报帖子

用pQE30双酶切加入目的片段，酶切位点（sPHI,Sal1）用NEB的HF，切了30分钟
是三个单菌落，出啦好多条带，怎么回事啊，我的目的片段504，我的载体3800左右（因为已经有一个片段了）。marker为：5000,3000,2000,1000,750,500,250,100.
我就剩一个怀疑的问题了：我构建这个质粒的时候，没有导入DH5α，导在了全式金公司的：Trans1-T1 Phage Resistant chemically Competent Cell
返回小木虫查看更多

今日热帖

精华评论

wlwsnoopy

载体是不是也有这些酶切位点。。。。
三个菌落切的还不一样，是不是污染了。。。
junxiao0320

引用回帖:
2楼: Originally posted by wlwsnoopy at 2012-03-18 21:37:02:
载体是不是也有这些酶切位点。。。。
三个菌落切的还不一样，是不是污染了。。。

质粒提完，就酶切了啊
就是照片中前面的质�
，
junxiao0320

引用回帖:
3楼: Originally posted by junxiao0320 at 2012-03-19 13:13:01:
质粒提完，就酶切了啊
就是照片中前面的质粒

，没有遇到过的吗？非常期待您的回复
junxiao0320

引用回帖:
2楼: Originally posted by wlwsnoopy at 2012-03-18 21:37:02:
载体是不是也有这些酶切位点。。。。
三个菌落切的还不一样，是不是污染了。。。

载体污染啦，？会是哪个环节污染呢？
潇灵玉雪

您好我也想做一下双酶切，而且我想要的是你这种图，你可以把你的体系告诉我一下吗？另外，你用的那两种酶是怎样进行筛选的？