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请教个毕赤酵母表达的问题

作者 diana0423: 来源: 小木虫 250 5 举报帖子

前段时间看了篇福建师范大学的硕士论文，那位作者用pPIC9K表达了一个木霉的内切葡聚糖酶。她是用Bgl线性化载体转化的。PCR验证得到阳性克隆后，她在论文里提到可以用YPD培养基发酵阳性克隆48小时，然后取上清测定内切葡聚糖酶的酶活力，来判断目的蛋白是否表达。这个地方让我很困惑。醇氧化酶的调控不是受到葡萄糖的抑制吗，为什么她可以用YPD培养基发酵得到内切葡聚糖酶，希望能有朋友为我解惑。返回小木虫查看更多

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zheng20089829

这个质粒好像是甲醇诱导型的表达吧，质粒包含了AOX启动子，添加甲醇诱导外援基因的表达
diana0423

引用回帖:
Originally posted by zheng20089829 at 2011-07-02 19:56:25:
这个质粒好像是甲醇诱导型的表达吧，质粒包含了AOX启动子，添加甲醇诱导外援基因的表达

这个我知道，所以我很纳闷为什么他用YPD也能诱导表达
，
zheng20089829

引用回帖:
Originally posted by diana0423 at 2011-07-03 00:01:28:
这个我知道，所以我很纳闷为什么他用YPD也能诱导表达。

这个是有点奇怪，联系作者。。。
biopanda

可能只是产酶量得问题。用YPD也能产酶，但是产酶量小，前提应该也要甲醇诱导吧。