【求助/交流】用gateway方法的请进，求教引物设计
想克隆一个基因，用 pENTR™ Directional TOPO® Cloning Kits技术，他们说要在翻译链的引物的5'加CACC，不知道引物设计时用不用严格要以DNA的开始密码ATG开始设计，还是可以用一部分ATG前面的一部分非编码区的碱基设计在引物里呢？请高手指教。
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如果你是先上pENTR，然后再上表达载体，那么你的引物设计要注意读框问题，
我做过GATEWAY,因为要过表达，所以当初就是以基因的ATG开始设计引物的
感谢两位的回答
小问，你前面不用带promoter及UTR序列吗？