那就用涂的方法~
取一点菌液，无菌水稀释，然后涂板
有时候平板太干确实不容易划好

划线时，起手不要太重。平板最好不要放太长时间，要不就用封口膜封好，放4度冰箱保存。

呵呵。。。。菌种活性降低了呗！！还有你用的是什么培养基啊？像LB或牛肉膏蛋白胨培养基一般划线都会长的，要是选择性的培养基或者营养贫乏的培养基，不长单菌落太正常了，

画完每个区后，都要灼烧接种环

画的时候不要太用力，细菌不宜长出单菌落，放线菌就比较容易了，你可以尝试用四区划线法，没画四个线最好把接种环烧一下，还有调菌的时候，不要太多！！

你保存的种子死了大半啦~
建议液体先~

菌种活性不好了，楼主可以从这次只有一点点生长的菌落上，挑取一点重新划线，生长就会好了。
楼主原来用于划线的菌是不是4度保存时间长了呀