【求助】荧光量子产率，难道没有一个熟手给个确定的回答吗？？
测荧光量子产率 到底是待测物的浓度和罗丹明的浓度一致，还是待测物的吸光值和罗丹明的吸光值一致？
这两种说法的人都有，岂不是乱套了，都是胡乱测的吗？
我觉得其实很多人都对于这个一知半解，胡乱测量的。讨论一下不好吗？
说吸光值一样的人肯定就是简单的用一个公式来计算的：产率=罗丹明产率x待测物荧光积分面积/罗丹明荧光积分面积，很多人都忽略了溶剂的不同，折光率的不同啊。
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后记:
Quantum Yield [Q.Y.] Standards Q.Y.[%] Conditions for Q.Y. Measurement Excitation [nm] Ref.
Cy3 4 PBS 540 1
Cy5 27 PBS 620 1
Cresyl Violet 53 Methanol 580 2
Fluorescein 95 0.1 M NaOH, 22°C 496 2
POPOP 97 Cyclohexane 300 2
Quinine Sulfate 58 0.1 M H2SO4, 22°C 350 2
Rhodamine 101 100 Ethanol 450 3
Rhodamine 6G 95 Water 488 3
Rhodamine B 31 Water 514 3
Tryptophan 13 Water, 20°C 280 2
L-Tyrosine 14 Water 275 2
这个是热心的虫友无敌锋火轮提供的，http://www.iss.com/resources/yield.html
看了以后我被彻底打败了，测产率是一个多么艰巨的任务啊。
有注意到吗？罗丹明B 在水中的产率是31，而且是在激发波长514nm的情况下。不知道很多人弄对了吗？
[ Last edited by baiyal2000 on 2009-3-31 at 09:37 ]
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京公网安备 11010802022153号
溶剂的因素不是已经在测紫外吸光度的时候排除了嘛 PL的话又没有溶剂影响的
荧光效率是很复杂的，首先就是怎么选择标准样。通常必须选择和你要测的荧光物质发射波长峰值相近的标准染料（已知荧光效率的染料),所以如果你是用罗丹明的话只能测量550 nm－650nm附近的染料的效率，差的太远的话会很不准。因此在确定用什么标准物之前现告诉大家你的未知物的发射波长把。其次样品浓度不必和标准物相同。但是两者的浓度都要求非常的低。最好吸光度小于0。1。还有很多因素会影响荧光效率。总结如下用标准物测量的话误差大约在10％左右。
罗丹明6G的激发波长一般定为它的最大吸收波长即525nm-528nm。
以罗丹明6G为标准，同时，分别测量罗丹明6G和待测荧光物质的吸光度和荧光光谱，并通过积分得到相对应的荧光强度的面积。测量中使用了六个不同浓度的罗丹明6G和待测荧光物质的溶液，它们的吸光度都小于0.1。以荧光强度的积分面积和吸光度作图，得到一条斜率为M的直线。我们通过如下公式计算量子产率：
（1）QY(x)=QY(S)*(Mx/Ms)/(nx/ns)^2
其中s代表标准样（罗丹明6G）, x代表被测样， x是荧光量子产率。 n是相对的溶剂的折光系数。
文献：Crosby, G. A.; Demas, J. N. J. Phys. Chem. 1971, 75, 991.
测量罗丹明和待测样的荧光强度面积的时候激发波长是应该是一样的吧 还是选各自的最大吸收波长?
还有 貌似是罗丹明的乙醇溶液在激发波长是488nm的时候量子产率才是95%..
参考这个网站:
http://www.iss.com/resources/yield.html
所以,那激发波长到底该怎么选呢
，
具体，请参考以下中文文献，如果要考虑到折光指数的影响，还须在最后乘式中补乘ns^2/nr^2,ns是待测样品，nr指参比。
我想说的是，根据传闻罗丹明b只有在乙醇中的产率是90%，在水中是31%。
[ Last edited by baiyal2000 on 2009-3-31 at 09:41 ]
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兄弟,请明确的告诉我，和浓度是没有任何关系的吧？