做荧光的时候怎么操作去确定一个新物质的激发波长? 返回小木虫查看更多
先任意找一个波长做发射,比如选300nm做发射(因为激发波长只能影响发射峰的强弱,而不能够影响发射峰的位置),在发射谱图里最大峰位置的波长做激发,即可得到激发谱图,在激发谱图里的最大峰位置的波长即为你要找的激发波长
可以先用紫外扫描一下
我觉得先用几个能量较高的激发波长激发样品(一般情况下样品就会被激发),因为样品的荧光峰的位置不会随激发波长而改变,这样可以先确定其荧光峰的位置,然后再荧光发射波长,去扫描激发,找到其最大激发波长。 理论上讲,物质的吸收光谱和其激发光谱形状相同,但由于荧光测量仪器的特性,比如说光源的能量分布,单色器的透射率,检测器的敏感度都随波长而改变,所以两种光谱有所差异,但可以作为参考,来定其大致的激发波长,然后来扫描发射,找到荧光峰,再反扫描激发即可,
做紫外吸收最大的波段吧? 或者做一个荧光激发光谱与发射光谱啊。
建议用F-4500型荧光分光光度计扫描样品的三维荧光光谱图,激发和发射波长就很好确定了。
先任意找一个波长做发射,比如选300nm做发射(因为激发波长只能影响发射峰的强弱,而不能够影响发射峰的位置),在发射谱图里最大峰位置的波长做激发,即可得到激发谱图,在激发谱图里的最大峰位置的波长即为你要找的激发波长
可以先用紫外扫描一下
我觉得先用几个能量较高的激发波长激发样品(一般情况下样品就会被激发),因为样品的荧光峰的位置不会随激发波长而改变,这样可以先确定其荧光峰的位置,然后再荧光发射波长,去扫描激发,找到其最大激发波长。
理论上讲,物质的吸收光谱和其激发光谱形状相同,但由于荧光测量仪器的特性,比如说光源的能量分布,单色器的透射率,检测器的敏感度都随波长而改变,所以两种光谱有所差异,但可以作为参考,来定其大致的激发波长,然后来扫描发射,找到荧光峰,再反扫描激发即可,
做紫外吸收最大的波段吧?
或者做一个荧光激发光谱与发射光谱啊。
建议用F-4500型荧光分光光度计扫描样品的三维荧光光谱图,激发和发射波长就很好确定了。