有可能使载体自连太严重了，
你的T载体是不是很长时间了？你做一个T载体自连实验，看一下，是不是自连率很高！如果是建议换一批T载体，
如果是新载体，自连很厉害，你可以找试剂公司让他给你换一批！

祝你好运1

我现在也怀疑是载体的原因，我用的载体是实验室自己配置的。刚用别人试剂盒的载体拿来试验一下。

但我还是很奇怪如果是载体自连的话，也应该是蓝斑，不应该是白斑吧。

晕,提了质粒不做酶切和PCR鉴定就直接测么,太浪费了吧,呵

呵呵，我目前待的这个实验室的传统说是不用做，因为成功率高。
不过现在做了，呵呵～

也有可能是假阳性吧，你测序之前先提质粒，pcr验证看看有没有所需条带。然后再测序

1）有可能是载体自连的假阳性；
2）作时AMP、IPTG和X-Gal其中一种或几种没涂均匀。
3）有时即使插入片段也会出现篮斑。只要编码框没被破坏。
如果实验室别人用这个载体没问题，那么可能就是2、3原因。重做一遍，如果还是那样，很可能是你的插入序列并没有破坏其编码框，换个载体试试吧，

我最近也在做蓝白筛选，假阳性的比例挺大的。假阳性的可能有很多种，主要和菌的生长有很大关系，并不一定是白色就有插入片段的。相反，有些显蓝色的，却可能有插入片段，因为插入片段较短（<500bp），并且没有影响LacZ基因的读框，因此菌落就可能现蓝色或浅蓝。