请教：有关过柱的若干小问题。请大家及时给与帮助，谢谢！
最近开始过柱，存在一些疑问，在此请教各位有经验的高手，希望大家不吝赐教，谢谢！
1.装样前淋洗的目的是什么？这一操作要多久，需多少洗脱剂
2.过柱一般可分离多少样品？与柱子大小、硅胶用量有关吗？
3.用干法装样时，样品溶解性很差怎么办？
4.梯度洗脱具体怎么操作，什么时候改变溶剂极性，怎么改变？
5.过柱滴速一般多大？加压时，洗脱剂流速相对快些，会影响分离效果吗？这与把活塞开大点有什么不同？
6.过一根柱子大概要多久？过柱中途可以停止吗？会有什么影响
7.洗脱剂中有二氯甲烷时，柱中有气泡产生？有什么应对办法？
8.最后一个，洗脱剂可回收重用吗？
过柱中可能还有许多需要注意的地方，但我还没碰到，大家能不能谈谈自己在过柱中遇到的问题，你又是怎么解决的呢？
大家给点建议啊，不一定要全部做出回答，可就其中几个问题谈谈自己的看法，谢谢了！！！
感谢大家的回答，帮助我解决了一些问题，但还有两点不太明白，3和4
3.昨天过了一根柱子，我用干法装样，样品不能完全溶解在溶剂中，没有被硅胶充分吸附，所以在过柱中有些已经被洗脱掉了，但还有一部分还在装样的硅胶中（样品是有色的，能观察到），所以点板时还有两个点,没有分开。
4.关于Rf和淋洗剂，一般说Rf在0.2～0.3并稀释一倍的淋洗剂比较好，但我也是用梯度洗脱，失败！怎么根据Rf选脱剂还是不明白，上面说的0.2～0.3，是指所要产品的Rf值还是点板时最上面的Rf，比如样品点板是有3个点，Rf分别为0.13、0.25和0.38，中点的是我要的产品，那么这种稀释一倍的展开剂可以一开始就用来洗脱吗？应该怎样?
[ Last edited by 2007fm on 2008-6-6 at 09:04 ]
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楼上说的不用活塞调节流量，难道活塞一直开到最大，滴速还是1-2D/S，如果这样，那说明我装的柱就不合格了，但我按湿法装柱的步骤做的啊，想不明白
没有那么严格的要求啊，其实吧多操作几次熟悉了也就明白该怎么做了，实践和理论还是有差别的
欢迎大家继续参与回答，主要针对一编辑过的3、4问题，蓝色部分
谢谢！！！
如果样品不能很好的溶解，你用干法肯定不能很好的分离，硅胶上层会留有一层固体。用超声波震荡试试，如果还不能溶解，就是你淋洗液选择的问题了。
梯度淋洗是干法必须的。 （例如：最初你用纯甲醇洗的柱子。分离所用淋洗液是按一定配比的甲醇和水。根据分离的最终所需淋洗液的配比，进行各种配比的调配，然后进行梯度洗涤。 重纯甲醇开始，逐渐减小甲醇的比例，直到调至所需淋洗液的配比。 ）
具体情况就要按你的产品来选择合适的淋洗液来调配比了。
1，目的是让柱子实一些
2，分离样品量与柱子有关，一般的，越长，效果越好，越粗，分的量越多
3，加良溶剂和吸附剂，旋干，这是样品应为很小的颗粒，溶解性差点没问题
4，分离时加大洗脱液极性，主要点板看
5，快慢一般没有关系
加压会越来越慢
6，中间最好不要停，否则分离物扩散，影响柱效
7，有气泡主要是溶剂和吸附剂混合时，有点放热，装柱前泡泡，搅搅
8 ，洗脱剂可回收重用，最好重整一下
如果不赶时间，建议先用极性小的溶剂将硅胶泡个小时，这样可以完全浸透，没有气泡产生。
好帖子啊 一定要顶
3.昨天过了一根柱子，我用干法装样，样品不能完全溶解在溶剂中，没有被硅胶充分吸附，所以在过柱中有些已经被洗脱掉了，但还有一部分还在装样的硅胶中（样品是有色的，能观察到），所以点板时还有两个点,没有分开。
我大部分也是用干法装样，如果产品没有完全被硅胶吸附的确有影响，但是如果你装的样很薄，这种影响很小。
4.关于Rf和淋洗剂，一般说Rf在0.2～0.3并稀释一倍的淋洗剂比较好，但我也是用梯度洗脱，失败！怎么根据Rf选脱剂还是不明白，上面说的0.2～0.3，是指所要产品的Rf值还是点板时最上面的Rf，比如样品点板是有3个点，Rf分别为0.13、0.25和0.38，中点的是我要的产品，那么这种稀释一倍的展开剂可以一开始就用来洗脱吗？应该怎样?
Rf跟过柱之间有多大影响我不太清楚，但从我过柱的经历来看，如果在展开剂（当然展开剂也要适合做淋洗剂）能够分开，过柱基本上能分开（有一点除外：如果你得产品会随着淋洗剂的脱溶而带出来，这种淋洗剂就不适合）。如果分不开，我就减小淋洗剂的极性，这样就可以分开，同时，有个缺点，淋洗剂的极性越小，柱子过的越慢，淋洗剂消耗也越多，