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分类 共搜索到 45 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
分子生物 推动数字PCR在实验室中的普及:面临的挑战与应对之道
小体积,轻重量4.pcrmix的高兼容性5.液滴稳定性高6.耗材成本低7.仪器成本低8.临床超多重检测技术9.免凑样或极少量凑样10.兼容数字等温扩增功能结合目前实验室的这十大需求,一款小巧轻便、...
Turtle_tech 2024-01-25 03:16
分子生物 实验干货|分子克隆实验——无缝克隆
为了减少扩增突变的引入,推荐使用高保真PCRMix进行扩增,推荐使用预线性化的质粒作为模板,以减少环状质粒模板残留对克隆阳性率的影响。注意:以环状质粒为模板时,PCR产物需要使用DpnI等...
李英华001 2023-07-28 01:05
微生物 革兰氏阳性菌(短乳杆菌)菌落pcr无条带求助
挑了48h的单菌落或者是冰箱保存的平板菌,95/98°-10min作为预变性,然后就是正常的pcr,每cycle延伸1min(在大肠杆菌质粒扩增可以1min扩增出2kb...我们实验室有酶,不知道那个可以,pcrmix
wc卫成 2022-06-25 02:54
分子生物 荧光PCR preMIX
荧光PCRmix配好的原液为什么要过滤呀?biostar2009wizardfan
KXMD_CH 2021-07-06 01:49
分子生物 有关mix组分对高浓度模板的扩增影响,求大神解答
自己配置的pcrmix,做了模板浓度梯度进行扩增,其他梯度效果就很好,高浓度的就不好,在不加rox的机器上只是高浓度模板的平台期低,加rox的机器上高浓度模板直接扩不出来是因为什么呀,是...
朱静zz 2020-05-26 08:20
分子生物 PCR无条带
我连接转化后的菌液,放4度冰箱差不多有两个月了,今天重新涂了平板,蓝白斑筛选后,按正常程序跑了PCR,电泳,PCRMix用的新买的康为2xEsTapMasterMix,跑了100多个菌液的样,但是没有一条...
分子小白呀 2019-09-18 12:30
微生物 pcr mix
求助~!自己做的mix跑不出东西哈~有没有什么可以加入pcrmix的染料?
吃瓜的半仙 2019-02-01 05:27
分子生物 PCRmix
求助:为什么买来的PCRmix可以用很久,自己混的PCRmix过了两天就不好用了?
cxkhhh 2019-02-01 03:25
分子生物 求助,PCR电泳拖尾很厉害
本人现在目的基因片段是244bp,引物二聚体是40bp,用的DNAMarker为DL500,最亮条带是200bp,其余分别为50、100、150、300、400、500bp,用的是宝生物、捷瑞公司的PCRMIX,反应条件、反应...
18257737914 2017-10-29 03:47
分子生物 求助,PCR纯化产物分光光度计与电泳结果不符
本人现在现在用的是天跟的PCRMIX,然后用的是omega的纯化试剂,现在遇到的问题是:我纯化后的PCR产物(只有244bp),在酶标仪、分光光度计检测下浓度相差不大,都是50ul的PCR体系中可以提取...
18257737914 2017-09-19 03:51
分子生物 冻干PCR相关注意步骤——加急!
有人了解PCRMix冻干的注意事项么,如何确保冻干的Mix之间具有较好的一致性?冻干后酶的活性和损失量,还有其他成分的损失量如何呀?加急,请大神们赐教!
O天琊O 2016-10-31 03:22
分子生物 自配PCRMIX扩增效率不高或无法扩增
因为实验需要,配制一个PCR反应体系(未加酶,其他的成分都加了)后取出一部分加酶,25℃孵育2-3小时,未加酶的部分也相同条件处理,在孵育后,PCR前加入相同呢体积的酶,一起进行PCR扩增,...
love犬夜叉 2016-08-12 06:37
分子生物 PCR mix与PCR Plus mix之间的区别是什么呢?
上次有一个诺唯赞的推销员来我们实验室推销试剂,本来是没打算买的,后来叫人送来了试用装,上面写着一个是PCRmix另外一个是PCRPlusmix,我并不是很懂这个Plusmix的意思,但是估计是能扩增...
yushin_young 2015-12-13 03:24
分子生物 请教dNTP方面的一点问题。
楼前段时间自己配制了PCR体系实验,结果有些问题想请教下各位主要是研究PCRMIX的成分,大的方面分了两个:一个是自配的PCRBuffer,一个是自配的dNTP(U/A/C/G)但是通过反复的实验,发现自配...
z631535213 2015-12-08 01:46
分子生物 求助pcr扩增扩不出目的条带
目的片段1082bp我是用的25微升体系:ddH2O15微升、PCRmix8微升、引物分别0.5微升、DNA1微升PRIMER6上下游引物Tm值分别为:54.2°和54.6°程序为:95°5min、94°1min、55°1min、72°1min05s...
secretov 2015-04-30 09:13
分子生物 两重PCR程序求求求设计。
酶是天根2×PCRMix,用量10ul,模板100ng,引物1用量0.5微升,引物2用量0.5微升,20ul体系95℃3min94℃1min58℃30S72℃30S12个循环94℃1min55℃30S72℃1min31个循环72℃6min试了很多程序,...
美丽坏东西 2014-12-04 08:37
分子生物 菌液PCR和质粒PCR的比较
本人最近在大批量的做克隆,需要进行PCR验证,发现一个很...同一个人操作,PCRmix和PCR程序完全一样,就是模板不同。究竟用菌液进行验证插入正确的概率如何?麻烦虫虫们发表一下自己的观点埃。
yesucao 2014-11-19 08:06
分子生物 巢式PCR空白对照第一轮没有条带,第二轮有条带!
各位大神:我做的是巢式PCR,电泳检测的结果是:1、实验组:第一、第二轮都有条带2、空白对照:第一轮没条带,第二轮有条带DDH2O、枪头、PCR管、都是新灭菌的,PCRMix也是刚开封的,这种...
柠檬可乐星 2014-11-16 06:12
分子生物 PCR反应体系改变会导致电泳不出带吗
以反转录后的cDNA为模板,在扩增管家基因(18sRNA)的时候,刚开始用的是10μl反应体系,体系中用的是PCRMix,电泳后有出现条带。但由于是新手的关系,忘记加空白对照跟Marker,加上电泳...
小朱大宝 2014-10-20 07:26
分子生物 熔解曲线单峰,但电泳却发现除目的条带外的非特异扩增带(亦非...
骨髓瘤细胞系,目的基因MDM4-FL反应体系:正反引物各0.65ul(浓度为0.3uM)模板cDNA7.6ul(TAKARAPrimeScriptRTreagentKit反转后,-10×稀释)PCRMIX12.4ul...预变性95度10min变性95度10s...
memesasa 2014-10-07 08:29
分子生物 SSR-PCR 杂带很多 求解决方案
备注:10ul反应体系PCRmix5-6ul,premierF/R各0.5ul,模板1ul(约40ng),ddH20补齐。反应程序:94℃4min,94℃50S,63.4℃50S,72℃30S,30cycle,72℃7min,电泳上样2ul,电泳40min,硝酸银染色,...
syp719 2014-07-21 12:56
分子生物 求助大神们 CDNA片段PCR扩增之后没有目的条带 全是拖带
图在下面每次扩增出来都是这个样子已知CNDA引物是没有问题的现在是不是模板的量出了问题模板用了2ul,引物各2ul,PCRmix25ul,dd水19ul体系是50的目的条带应该在1900bp左右,是不是PCR的...
200806773 2014-07-16 03:01
分子生物 PCR的可重复性
PCRmix也是新的,也换过牌子;换过PCR仪;换过操作的人.真是百思不得其解啊,望高人指点迷津啊,不甚感激!此外,我在N篇文献上找到别人扩增的引物和PCR条件,引物都是通用的,结果用到自己...
hospitals 2013-11-29 01:14
分子生物 [求助]PCR后跑胶结果如图,请大家帮忙分析一下,谢谢各位
marker左边是用PCRmix做的,前三个是样品(模板量为3ul,引物1ul),第四个是质粒做阳性对照(模板量为1ul,引物1ul);marker右边是用Taq酶做的,前三个是样品(PCRbuffer2.5ul,Mg1.5ul,...
一路向南_J 2013-11-04 01:17
分子生物 16S rDNA阴性对照有条带
现在在做16SrDNA测序,用的是pcrmix,但是发现阴性对照老是有条带,做了一个星期了,改灭的都灭了,改换的也换了,样品的目的片段倒是很亮,请问各位高手,这样的条带能回收去测定么?...
phytoman 2013-10-22 01:03
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