24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1816  |  回复: 4

yesucao

木虫 (正式写手)

[求助] 菌液PCR和质粒PCR的比较 已有4人参与

本人最近在大批量的做克隆,需要进行PCR验证,发现一个很奇怪的现象:用单克隆菌液做PCR发现空载率很高,但是用提取的质粒进行PCR验证发现空载率很低。同一个人操作,PCR mix和PCR程序完全一样,就是模板不同。究竟用菌液进行验证插入正确的概率如何?麻烦虫虫们发表一下自己的观点啊。。。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yesucao: 金币+1, 有帮助 2014-11-20 16:29:02
菌液验证方便快捷,但是质粒验证说服力更强。
学习使你立于不败之地
2楼2014-11-20 16:04:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yesucao(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-20 18:37:44
yesucao: 金币+3, 有帮助 2014-11-21 12:18:24
总的来说,准确率:质粒酶切验证>质粒PCR>菌液PCR。你用多种酶切进行验证,对了就可以测序。
3楼2014-11-20 17:13:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

conanyangqun

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
今天刚刚做的。同一个质粒,菌液PCR效果不如质粒PCR。两个都是阳性,但酶切结果却不对。不清楚为啥PCR扩出来了。感觉,PCR不太稳定吧。。。
4楼2014-11-22 04:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dnaxxx

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人认为,菌液pcr假阳性高,可能是因为挑克隆时沾到了未连接的DNA片段或未转化好的已连接载体

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-11-22 04:53:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yesucao 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 302求调剂一志愿华中师范大学 +7 小江小江江江 2026-04-02 7/350 2026-04-02 21:48 by macy2011
[考研] 349求调剂 +10 zwjjjjjj 2026-03-31 10/500 2026-04-02 20:13 by dongzh2009
[考研] 学硕化学工程与技术,一志愿中国海洋大学320+求调剂 +8 披星河 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:12 by oooqiao
[考研] 272求调剂,接受跨专业调剂! +4 闲鱼卢 2026-03-31 4/200 2026-04-02 11:18 by guyan1000
[考研] 270调剂 +7 maxjxbsk 2026-04-02 7/350 2026-04-02 09:50 by yulian1987
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
[考研] 土木304求调剂 +6 兔突突突, 2026-03-31 7/350 2026-04-02 09:06 by coolminer
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +12 hanamiko 2026-03-27 12/600 2026-04-01 22:34 by 运气yunqi
[考研] 298求调剂 +4 什么是胖头鱼 2026-03-30 6/300 2026-04-01 22:06 by 客尔美德
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-30 16/800 2026-04-01 17:58 by 邱gl
[考研] 0856,材料与化工321分求调剂 +13 大馋小子 2026-03-27 14/700 2026-04-01 15:58 by yanflower7133
[考研] 262求调剂 +9 励志一定发文章 2026-03-31 10/500 2026-04-01 12:22 by sunshine0013
[考研] 求0861交通运输专硕or材料专硕调剂 +4 勒布朗@ 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:54 by 一只好果子?
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-03-31 11/550 2026-04-01 09:43 by xiayizhi
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业,初试351分,复试被刷求调剂! +9 真名有冰 2026-03-29 10/500 2026-03-31 18:01 by xhai2011
[考研] 085601 329分调剂 +6 yzsa12 2026-03-31 6/300 2026-03-31 15:23 by yanflower7133
[考研] 一志愿西电085401数一英一299求调剂 六级521 +4 爱吃大鸭梨 2026-03-31 4/200 2026-03-31 11:51 by 搏击518
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
[考研] 一志愿南开大学0710生物学359求调剂 +5 兔兔兔111223314 2026-03-29 7/350 2026-03-30 18:29 by 兔兔兔111223314
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-27 7/350 2026-03-28 07:43 by 热情沙漠
信息提示
请填处理意见