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自然茶

新虫 (小有名气)

[求助] 目的片段,载体连接 已有5人参与

大家好,我现在要做质粒,与载体的连接实验。但是有个体系不会算,就是载体与目的片段基因的摩尔比是1:10,我现在知道各自的浓度,连体体系10ul,那么,摩尔比怎么计算啊?取多少ul是1:10关系?

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liuxinyueer

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1

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欢迎讨论,小木虫未能及时回复,请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
2楼2015-12-26 20:27:10
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siriusxuan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做了若干个分子了,从来都是看心情,心情不好了多加点,心情不好少加点。
心情好了26度连2个小时,心情不好16度过夜,然后回家睡大觉。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

此座可言轻社稷,江山万里起风尘。
4楼2015-12-26 23:06:09
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今生彼此

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这是我实验本上的
目的片段,载体连接
FullSizeRender.jpg

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8楼2015-12-27 22:00:30
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yilberg

新虫 (小有名气)

不用这么精确 我一般都是DNA:载体=3:1

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6楼2015-12-27 10:13:02
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普通回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做分子生物3年了,从没算过,大约就行。      双链DNA分子量估计方法:660*链长   ,然后直接用质量浓度/摩尔质量,既得摩尔浓度。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

生物科学
3楼2015-12-26 20:54:03
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siriusxuan

木虫 (正式写手)

但是,一般载体加25-50ng,片段比它多点。
此座可言轻社稷,江山万里起风尘。
5楼2015-12-26 23:07:25
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
刚进来也是说,有公式要算,后来真是看心情,浓度高了少加一点,浓度低了多加一点,保证目的片段的量足够多

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

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天道酬勤
7楼2015-12-27 10:45:37
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自然茶

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yilberg at 2015-12-27 10:13:02
不用这么精确 我一般都是DNA:载体=3:1

请问你们这个3:1是什么比啊?我刚做,不懂

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9楼2015-12-27 22:29:33
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自然茶

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuxinyueer at 2015-12-26 20:27:10
NEB摩尔比计算
http://nebiocalculator.neb.com/#!/ligation

谢谢啦

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10楼2015-12-27 22:31:18
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