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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 目的片段，载体连接
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自然茶

新虫 (小有名气)

[求助] 目的片段，载体连接 已有5人参与

大家好，我现在要做质粒，与载体的连接实验。但是有个体系不会算，就是载体与目的片段基因的摩尔比是1:10，我现在知道各自的浓度，连体体系10ul，那么，摩尔比怎么计算啊？取多少ul是1:10关系？

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1楼 2015-12-25 10:15:46
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liuxinyueer

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
NEB摩尔比计算
http://nebiocalculator.neb.com/#!/ligation
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自然茶
欢迎讨论，小木虫未能及时回复，请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
2楼2015-12-26 20:27:10
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siriusxuan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做了若干个分子了，从来都是看心情，心情不好了多加点，心情不好少加点。
心情好了26度连2个小时，心情不好16度过夜，然后回家睡大觉。
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自然茶
此座可言轻社稷，江山万里起风尘。
4楼2015-12-26 23:06:09
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今生彼此

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这是我实验本上的
目的片段，载体连接
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自然茶 自然茶
8楼2015-12-27 22:00:30
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yilberg

新虫 (小有名气)
不用这么精确 我一般都是DNA：载体=3:1

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6楼2015-12-27 10:13:02
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普通回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做分子生物3年了，从没算过，大约就行。      双链DNA分子量估计方法：660*链长   ，然后直接用质量浓度/摩尔质量，既得摩尔浓度。
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自然茶
生物科学
3楼2015-12-26 20:54:03
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siriusxuan

木虫 (正式写手)
但是，一般载体加25-50ng,片段比它多点。
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此座可言轻社稷，江山万里起风尘。
5楼2015-12-26 23:07:25
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
刚进来也是说，有公式要算，后来真是看心情，浓度高了少加一点，浓度低了多加一点，保证目的片段的量足够多

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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自然茶
天道酬勤
7楼2015-12-27 10:45:37
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自然茶

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yilberg at 2015-12-27 10:13:02
不用这么精确 我一般都是DNA：载体=3:1

请问你们这个3:1是什么比啊？我刚做，不懂

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9楼2015-12-27 22:29:33
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自然茶

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuxinyueer at 2015-12-26 20:27:10
NEB摩尔比计算
http://nebiocalculator.neb.com/#!/ligation

谢谢啦

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10楼2015-12-27 22:31:18
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