24小时热门版块排行榜    

查看: 3504  |  回复: 11

khl8889

新虫 (小有名气)

[求助] 关于SDS-PAGE跑胶问题 已有6人参与

SDS PAGE电泳后,发现大部分蛋白在浓缩胶与分离胶交界处,跑不下去,如附件图所示。不知是何原因?十分焦急!!!请各位虫友指点。

关于SDS-PAGE跑胶问题
20151125_150606.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

why0393

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果中间没样本就尽量靠近中间加样吧,一般这种问题和缓冲液的关系非常大,建议更换新配的缓冲液
偶看到蛋白marker和第二列中间条带有些偏向了,好像是加浓缩胶前分离胶上层没弄干净,或者漏样了。
另外,加样量可以再减少些
12345
2楼2015-11-26 13:56:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要么胶的浓度有问题,不同浓度的胶适用的分子量大小不太一样,自己查查,要么电泳缓冲液有问题,重新配新的,还有点样量少一些。跑的时间在长点。祝顺利
3楼2015-11-26 14:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

khl8889

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hc-material at 2015-11-26 14:17:16
要么胶的浓度有问题,不同浓度的胶适用的分子量大小不太一样,自己查查,要么电泳缓冲液有问题,重新配新的,还有点样量少一些。跑的时间在长点。祝顺利

非常感谢!我重新配缓冲液试试。
4楼2015-11-26 23:59:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沐枫之城

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
marker跑开了(到底有没有完全跑开你可以根据你的marker信息看一下),那么应该就是你上样量太大,建议上样量小点,可以做个梯度上样量看看哪个比较合适。
另外楼主的胶是串样还是最后面的也点样了?
5楼2015-11-27 00:52:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

khl8889

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 沐枫之城 at 2015-11-27 00:52:07
marker跑开了(到底有没有完全跑开你可以根据你的marker信息看一下),那么应该就是你上样量太大,建议上样量小点,可以做个梯度上样量看看哪个比较合适。
另外楼主的胶是串样还是最后面的也点样了?

所有孔都点样了包括最后面的,只不过是不同的样品。
6楼2015-11-27 06:19:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
7楼2015-11-27 06:40:00
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

遥控器68

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白质量不行,胶浓度不适合,这是俩最可能的原因。
8楼2015-11-29 09:19:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

曼舞流苏

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得楼主在制备蛋白样品时,离心吸取上清液时候把沉淀也吸走了吧。才导致你这样品分离不下去。
9楼2015-12-04 15:22:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朕不杀你

新虫 (初入文坛)

分离胶浓了吧
10楼2015-12-05 17:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 khl8889 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料080500调剂求收留 +4 一颗meteor 2026-03-13 4/200 2026-03-19 10:32 by 30660438
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +3 枫桥ZL 2026-03-18 3/150 2026-03-19 10:15 by 功夫疯狂
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +10 SUICHILD 2026-03-12 10/500 2026-03-19 09:51 by Delta2012
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:35 by bingxueer79
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-13 6/300 2026-03-18 14:14 by 脱颖而出
[考研] 0703化学调剂 +4 pupcoco 2026-03-17 7/350 2026-03-18 12:14 by djl2006
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 0703化学求调剂 总分331 +3 ZY-05 2026-03-13 3/150 2026-03-18 10:58 by macy2011
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
信息提示
请填处理意见