应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于SDS-PAGE
71/1返回列表
查看: 869  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

weiminhb

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于SDS-PAGE

最近做SDS-PAGE，跑出来的带总是连成一片，分不开。而且marker也很模糊，拖尾了。是什么原因呢？
       还有我的样品是胞内产物，我是这样处理样品的：将培养液离心，取菌体，然后用PBS悬浮，加入等量的SDS上样缓冲液，沸水煮5min，然后离心取上清，将上清跑电泳。请问这样的操作对吗？请高手点评。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-24 18:46:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
weiminhb(金币+3): 2010-12-24 21:00:49
过程没有大问题，不知道你的SDS上样缓冲液是不是2*的，你加了等体积。如果不是大肠杆菌而是革兰氏阳性菌的话，最好能煮上10min。
赞一下 回复此楼
2楼2010-12-24 19:08:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiminhb

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-24 19:08:21:
过程没有大问题，不知道你的SDS上样缓冲液是不是2*的，你加了等体积。如果不是大肠杆菌而是革兰氏阳性菌的话，最好能煮上10min。

是2*的，是斯氏假单胞菌。
    带扩散是什么原因呢？是胶的问题还是？
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-24 21:00:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by weiminhb at 2010-12-24 21:00:35:




    是2*的，是斯氏假单胞菌。
    带扩散是什么原因呢？是胶的问题还是？

应该是胶的原因，还有电压放低一点。
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-24 22:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)
★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-12-24 23:15:17
引用回帖:
Originally posted by weiminhb at 2010-12-24 18:46:00:
最近做SDS-PAGE，跑出来的带总是连成一片，分不开。而且marker也很模糊，拖尾了。是什么原因呢？
       还有我的样品是胞内产物，我是这样处理样品的：将培养液离心，取菌体，然后用PBS悬浮，加入等量的SDS上样 ...

电泳液离子浓度高，电流大，产热较多，带型扩散。

可以降低电泳液浓度，还可以在低温下电泳
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-12-24 22:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wdyym

禁言 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2010-12-24 22:41:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

buckuper

铜虫 (小有名气)
摸索一下胶配制和电压的最适条件
赞一下 回复此楼
7楼2010-12-24 22:44:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 weiminhb 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭