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目的条带跑不开，是怎么了？？？
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我在做植物的内生真菌，我先简单说下，我提了植物总的DNA，用真菌通用引物ITS1F-ITS4跑的pcr，目的是扩增总DNA里边的真菌序列，一般目的条带是在500-750bp之间，根据文献，这个通用引物会同时扩增出植物的序列，但是扩增出来的植物序列都会比真菌的长。 目前我遇到的问题是：我能扩增出多条带，但是条带跑不开，或者说跑的不是很开，不知道怎么办？因为我还要切胶回收，做蓝白斑筛选，这样难度就很大。我用了5ulpcr产物跑的胶，会不会是产物点样太多，还是我的pcr循环了35次，太多了吗？我只想让这些条带分的清晰点，不要太多融合，另外我每次跑的条带都不直，我做胶已经很按要求了，是不是我点样的技术问题，还是电泳液要换新的？这三张图是我在调试不同退火温度的    发自小木虫Android客户端 |
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凝胶分离就像筛子一样！如果筛子分不开东西！只要你的样品没有太大问题！一般都会调整筛子孔径大小！可以调整胶浓度看看！ 发自小木虫IOS客户端 |
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14楼2015-11-03 23:59:07
2楼2015-11-03 20:19:50
3楼2015-11-03 20:22:39
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ufo29119690
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8楼2015-11-03 20:45:13
9楼2015-11-03 23:06:41
biostar2009
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- 专业: 生物化学
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你已经发现问题了，同理没跑开为什么没想到你的样品DNA也太多了？克隆为目的的根本不需要这么多。如果主带明显多于其他条带，全部直接克隆，挑出你想要的大小也相当容易。 发自小木虫Android客户端 |
10楼2015-11-03 23:08:17
40