| 查看: 2752 | 回复: 24 | |||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||||
[求助]
目的条带跑不开，是怎么了？？？
|
|||||
|
我在做植物的内生真菌，我先简单说下，我提了植物总的DNA，用真菌通用引物ITS1F-ITS4跑的pcr，目的是扩增总DNA里边的真菌序列，一般目的条带是在500-750bp之间，根据文献，这个通用引物会同时扩增出植物的序列，但是扩增出来的植物序列都会比真菌的长。 目前我遇到的问题是：我能扩增出多条带，但是条带跑不开，或者说跑的不是很开，不知道怎么办？因为我还要切胶回收，做蓝白斑筛选，这样难度就很大。我用了5ulpcr产物跑的胶，会不会是产物点样太多，还是我的pcr循环了35次，太多了吗？我只想让这些条带分的清晰点，不要太多融合，另外我每次跑的条带都不直，我做胶已经很按要求了，是不是我点样的技术问题，还是电泳液要换新的？这三张图是我在调试不同退火温度的    发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
wcq吴超群» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有178人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 重组的质粒跑胶怎么会如此诡异？
已经有3人回复
- 深圳公立医院门诊挂号费是多少？都是18元吗？
已经有7人回复
- 人这一生为什么要努力？
已经有62人回复
- 骗术，太恐怖了！安全第一 ，男女生一定要看，看完千万要转告亲朋好友！
已经有29人回复
- 很多人会错失爱情，为什么？看完这个文章才觉得需要学习的不仅仅是数理化
已经有15人回复
- 【求助/交流】电泳问题，非常奇怪，急求解决！
已经有23人回复
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10415.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
|
你已经发现问题了，同理没跑开为什么没想到你的样品DNA也太多了？克隆为目的的根本不需要这么多。如果主带明显多于其他条带，全部直接克隆，挑出你想要的大小也相当容易。 发自小木虫Android客户端 |
10楼2015-11-03 23:08:17
2楼2015-11-03 20:19:50
3楼2015-11-03 20:22:39
4楼2015-11-03 20:23:39
40