| 查看: 1409 | 回复: 5 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求大神指点，我的基因工程菌是不是退化了？
|
|||
|
师姐毕业了，老师让我测定她留下来的，一株导入脂肪酶的酿酒酵母的酶活。参考学姐的方法，我从-20℃冰箱里取出甘油保藏的菌种，在YPD固体培养基中涂布接种，没有加选择压力氨苄青霉素，培养了三天，37℃，观察到固体培养基均匀地长了两种不同的菌落， ，我以为是杂菌，就用YPD选择培养基，加入选择压力--氨苄青霉素，分离出了目的菌种。然后在固体培养基中连续传代三次，再接种至种子培养基中液体培养（摇床温度30℃，转速200rmp/min），传代三次，每12小时传一代。之所以在液体培养基中传代三次是因为学姐说要多传代几次，这样就可以使得菌种的活力高一些，哎，可我不知道这样对不对。然后，我就将得到的种子培养液接种到了诱导培养基中，所测酶活没有师姐之前测的高，她是70u/mg.min,我是20u/mg.min。我想验证一下诱导培养基没有染菌，于是又用了不加氨苄青霉素的YPD选择培养基（培养条件与之前相同）涂布了诱导培养基里培养出来的菌种，结果发现，菌落形态和之前的发生了比较大的变化，看上去是两种不同的菌。我觉得酶活降低和菌的这些变化有关。 请教各位大神，这到底是怎么回事，是菌种退化了呢，还是我的操作步骤有什么不妥。我刚刚学基因工程，实验室没有人做，只能自己摸索。恳求大神给一些建议！ |
回复此楼» 猜你喜欢
0860004 求调剂 309分
已经有4人回复
-
材料类284调剂
已经有25人回复
-
一志愿211 0703化学 346分求调剂
已经有5人回复
-
考研调剂-材料类-284
已经有17人回复
-
280求调剂
已经有3人回复
-
0703化学求调剂
已经有18人回复
-
调剂
已经有15人回复
-
复试调剂，一志愿郑州大学材料与化工289分
已经有16人回复
-
349学科化学045106求调剂，化学类都可以
已经有7人回复
-
086003调剂求助
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- RT-PCR，提的RNA浓度低，目的基因表达量也不高，怎么办？想二次PCR，附图
已经有1人回复
- 已经测好了基因序列，求帮忙指点怎么构建进化树
已经有0人回复
- 跪求大神指点关于ppic9k载体在酵母中表达
已经有16人回复
- 提取宏基因组 求大神指点
已经有7人回复
- 基因克隆 求帮忙，求指导
已经有3人回复
- 原谅我的不知天高地厚，论文已经被拒四次，求推荐合适杂志？
已经有3人回复
- 新手请教一下，换了个基因就不表达是什么原因
已经有5人回复
- 求交友，求助PCR大神，求带~~~
已经有10人回复
- 菌种鉴定中DNA-DNA杂交实验关键点，求大神指点，准备微量稀释板做
已经有0人回复
- 融合产物作为模板P不出来，求大神指点！！！
已经有9人回复
- 求大神指点qPCR结果，相对定量，动物给药后各个个体表达相差数量级，求助~~~~
已经有6人回复
- 全长PCR凝胶电泳后全是二聚体，求大神指点
已经有14人回复
- RACE产物太少，结果很差，求分析体系
已经有13人回复
- 求助，酶切之后，非但是没有产物，而且连原本的质粒也没跑出来
已经有6人回复
- 有关土壤微生物应用的实验，求大神指教
已经有2人回复
- 14年考研，就想考中科院，专业选择各种纠结，求各位大神帮助！！！！
已经有21人回复
- 求大神指点论文
已经有8人回复
- 哪位大神来告诉我，为什么最近提不出总DNA
已经有15人回复
- rt-pcr电泳图，求好心虫友帮助分析一下，跪谢。。。
已经有14人回复
- 求大神帮我看下我这个方案
已经有10人回复
5楼2015-08-13 12:21:21
dllchina
木虫 (著名写手)
有机的微生物大神
- MicEPI: 8
- 应助: 350 (大学生)
- 贵宾: 0.047
- 金币: 3202.9
- 散金: 1849
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 1599
- 在线: 233.4小时
- 虫号: 953932
- 注册: 2010-02-08
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2015-08-12 16:21:07
3楼2015-08-12 16:31:45
virty76
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 316 (大学生)
- 金币: 5402.7
- 红花: 10
- 帖子: 1677
- 在线: 451.5小时
- 虫号: 160547
- 注册: 2006-01-08
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2015-08-13 09:54:57
