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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 关于western转膜
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zlyzero

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于western转膜 已有2人参与

新手第一次做western，想把转膜之后的胶用考马染一下，实验室只有G-250考马斯亮蓝染液，不知道该怎么染色，如果有蛋白，染完之后会有什么现象

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-08-08 00:27:19
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

转膜之后还有染色，，我还没做过这个，转膜之后直接开始洗涤孵育，然后显影。。。可以看看这里的资料，和我们实验室的操作倒是一样的
http://www.detaibio.com/material-downloads.html
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
5楼2015-08-17 09:36:14
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673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
G-250就可以了，倒入染色液染3小时，之后脱色2-3小时（看到条带即可，尽量把背景脱干净），如果有蛋白则胶上会显示出蓝黑色的条带。
你做这个的目的是为了看转膜是否转完全吗？
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2楼2015-08-08 07:34:21
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zlyzero

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-08 07:34:21
G-250就可以了，倒入染色液染3小时，之后脱色2-3小时（看到条带即可，尽量把背景脱干净），如果有蛋白则胶上会显示出蓝黑色的条带。
你做这个的目的是为了看转膜是否转完全吗？

嗯啊！我是想看一看是不是转完全没，昨天只染了一个小时左右，感觉实验室那个染液好像是做什么标曲用的，染完后没有蓝黑色条带，百度上面的那个考马染液和实验室好像不同，

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-08-08 09:49:23
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673643401

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zlyzero at 2015-08-08 09:49:23
嗯啊！我是想看一看是不是转完全没，昨天只染了一个小时左右，感觉实验室那个染液好像是做什么标曲用的，染完后没有蓝黑色条带，百度上面的那个考马染液和实验室好像不同，
...

说明你转膜转的很完全啊，如果不放心那你就按照网上 的配方重新配一下。
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4楼2015-08-09 10:57:14
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