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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于转膜
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naturewave

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于转膜 已有3人参与

做Western Blot时 转膜停了 胶泡转膜液里2小时 发现预染marker颜色扩散 条带变得很宽很模糊 膜上的蛋白会扩散吗
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1楼 2013-05-11 16:49:09
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bojanchang

银虫 (小有名气)
★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-11 20:42:31
其他蛋白的命运应该跟marker的一样，估计也会降解，不过我觉得可能不是因为泡在里面2个小时的原因，更可能是转膜的条件吧
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2楼2013-05-11 17:10:08
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naturewave

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bojanchang at 2013-05-11 17:10:08
其他蛋白的命运应该跟marker的一样，估计也会降解，不过我觉得可能不是因为泡在里面2个小时的原因，更可能是转膜的条件吧

我觉得marker颜色扩散不是降解 应该是扩散 但是我不太确定是marker的蛋白扩散还是颜料分子扩散
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3楼2013-05-11 17:19:15
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naturewave

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bojanchang at 2013-05-11 17:10:08
其他蛋白的命运应该跟marker的一样，估计也会降解，不过我觉得可能不是因为泡在里面2个小时的原因，更可能是转膜的条件吧

转膜液中有甲醇 不知道在这样的溶液中 蛋白能否固定在胶上的某个位置上  就像蛋白固定在PVDF膜上一样
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4楼2013-05-11 17:21:56
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bullfrog325

木虫 (正式写手)
★
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把膜上的marker剪不重要的下来再染一染?
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5楼2013-05-11 19:29:25
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
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没有电场力的作用下蛋白分子会扩散。就像你跑胶途中停电一样。扩散程度取决于分子量大小。越小的蛋白扩散越严重。我认为你应该重新实验。如果你的目标蛋白分子量比较大，只是随便看看是否有信号，接着做也是可以的，但质量肯定不好了。
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6楼2013-05-11 23:42:11
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