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zlyzero

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于western转膜 已有2人参与

新手第一次做western,想把转膜之后的胶用考马染一下,实验室只有G-250考马斯亮蓝染液,不知道该怎么染色,如果有蛋白,染完之后会有什么现象

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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zlyzero

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-08 07:34:21
G-250就可以了,倒入染色液染3小时,之后脱色2-3小时(看到条带即可,尽量把背景脱干净),如果有蛋白则胶上会显示出蓝黑色的条带。
你做这个的目的是为了看转膜是否转完全吗?

嗯啊!我是想看一看是不是转完全没,昨天只染了一个小时左右,感觉实验室那个染液好像是做什么标曲用的,染完后没有蓝黑色条带,百度上面的那个考马染液和实验室好像不同,

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-08-08 09:49:23
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673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
G-250就可以了,倒入染色液染3小时,之后脱色2-3小时(看到条带即可,尽量把背景脱干净),如果有蛋白则胶上会显示出蓝黑色的条带。
你做这个的目的是为了看转膜是否转完全吗?
2楼2015-08-08 07:34:21
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673643401

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zlyzero at 2015-08-08 09:49:23
嗯啊!我是想看一看是不是转完全没,昨天只染了一个小时左右,感觉实验室那个染液好像是做什么标曲用的,染完后没有蓝黑色条带,百度上面的那个考马染液和实验室好像不同,
...

说明你转膜转的很完全啊,如果不放心那你就按照网上 的配方重新配一下。
4楼2015-08-09 10:57:14
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

转膜之后还有染色,,我还没做过这个,转膜之后直接开始洗涤孵育,然后显影。。。可以看看这里的资料,和我们实验室的操作倒是一样的
http://www.detaibio.com/material-downloads.html
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
5楼2015-08-17 09:36:14
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