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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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shadowing520

新虫 (初入文坛)

[求助] 求引物设计大神 已有1人参与

实验菜鸟，下面这段CDS序列需要扩全序列，但是引物总设计不好，用primer5设计分数不高，求各位大神帮忙设计下，万分感谢~~~~~~~~~~~~~
ATGCCTGTCACTTTTGATCAAGAACGCTATAATGTGTCTGTACCGTTTTCGACAGGTATTCACGGATTATCTGATGGCCATGGGATTCGAATTGTGGCAGTGCCAAAACATGGCGGGACGCTATTTACAGTGAATCTACGACGTGGTGACGATATTTATTTCCACTTCAATCCGCGCTTTAATCAAGGAGTAGTGGTGATGAACTGCGAAATTGGCGGCGCATGGCAACATGAAGAGTACATCGATCCCATTCCATTCACCGACTGCAAGCTGTTCACACTTGATCTCGTCTCCATTAATGGATCAGTCGAGATTGTCATTGATGGTGAACAACGAGGACGTTTCAGAATCCGTGAAGATCTGCGTCATGTGGATCGTTTTGAAGTGGACGGCGATGTAGAAGTTCATTCAGTTCATTATGGTGTTTGA
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1楼 2015-08-06 09:49:00
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shadowing520

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-06 17:28:31
耐药性不了解，如果确定你的基因没有内含子，可以以DNA做模板扩增该段CDS全长。是否需要全长看你实验目的，一般做功能验证分析都需要用全长。...

不太明白什么叫基因没有内含子，难道不是所有基因都有内含子的么？
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9楼2015-08-06 20:34:29
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
shadowing520: 金币+5, ★有帮助 2015-08-06 16:08:25
你这个因为要扩全长，位置其实没什么余地，只能通过调整上下游引物的长度尽量使Tm值接近就好，如果要构建相应表达载体，自己根据该基因酶切位点信息、载体酶切位点信息选择在引物前加酶切位点。F:ATGCCTGTCACTTTTGATCAAGAAC
R:TCAAACACCATAATGAACTGAATGAAC
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2楼2015-08-06 11:54:39
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zjqfjj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-06 11:54:39
你这个因为要扩全长，位置其实没什么余地，只能通过调整上下游引物的长度尽量使Tm值接近就好，如果要构建相应表达载体，自己根据该基因酶切位点信息、载体酶切位点信息选择在引物前加酶切位点。F:ATGCCTGTCACTTTTGA ...

F和R有什么区别
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3楼2015-08-06 12:14:17
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zjqfjj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-06 11:54:39
你这个因为要扩全长，位置其实没什么余地，只能通过调整上下游引物的长度尽量使Tm值接近就好，如果要构建相应表达载体，自己根据该基因酶切位点信息、载体酶切位点信息选择在引物前加酶切位点。F:ATGCCTGTCACTTTTGA ...

能帮我设计一下这个引物吗，序列长度需要选择在100——300，万分感谢
ATGGCTGACAACAGAGATAAAACCACGGACCAGATGAAGATGTGGAAGGAGGGCCGTGGAGCTCAGAGGGCTGACAAGCTGACCACAGGGGCTGGCCATCCCATTGGAGACAAGCTGAACCTGCAGACTGCAGGTCCCAGGGGTCCTCTGCTGGTCCAAGATGTGGTCTTCACAGATGAGATGGCCCACTTCGACAGGGAACGAATTCCAGAGAGAGTGGTGCACGCCAAAGGGGCAGGGGCATTTGGCTACTTTGAGGTGACTCACGACATCAGTCGTTACTGCAAGGCCAAGGTGTTTGAGCACATCGGCAAGACTACGCCCATTGCTGTTCGCTTCTCCACTGTGGCCGGTGAATCGGGATCAGCTGACACTGTGCGAGACCCCCGAGGCTTTGCAGTCAAGTTTTACACTGAGGGTGGCAACTGGGACCTGACGGGCAACAACACCCCCATTTTCTTCATCAGGGACGCTCTACTGTTCCCGTCCTTCATCCACTCCCAGAAGCGTAATCCTCAAACCCACATGAAAGACCCTGACATGGTGTGGGACTTCTGGAGCCTGAGGCCAGAGAGTCTGCATCAGGTGTCCTTCTTGTTCAGCGATCGAGGTTTGCCCGACGGCTACCGTCACATGAACGGCTACGGCTCTCATACCTTCAAACTGGTCAACAGCAACGGCGAGCGCTTCTACTGCAAGTTCCACTACAAAACTGATCAAGGAATAAAGAATCTGCCGGTTGAGGAGGCAGACCGCCTGGCTTCCACCAACCCAGATTATGCCATCGGAGACTTGTTTAACGCCATTGCCAATGGGAACTTCCCGTCCTGGACTTTCTACATCCAGGTTATGACCTTTGAGCAGGCTGAGAAGTTCCAGTTCAACCCATTCGATCTTACCAAGGTTTGGTCACACAAAGAATACCCTTTGATCCCTGTGGGCAAAATGGTGCTGAACAGGAACCCAGTCAACTACTTTGCAGAGGTGGAGCAGCTGGCCTTTGACCCCAGCAACATGCCACCAGGCATCGAGCCAAGCCCTGACAAGATGCTGCAGGGTCGCCTCTTCTCCTACCCAGACACGCATCGACACCGTCTGGGAGCCAACTACCTGCAGCTCCCTGTCAACTGCCCCTTCAGGGCCCGCGTGGCCAACTACCAGCGCGATGGTCCTATGTGCATGTTTGACAACCAAGGTGGAGCTCCAAACTACTATCCAAACAGCTTCAGTGCCCCGGAGACCCAGCCTCAGTTTATGGAGTCCAAGTTCAGCGTGTCTCCAGATGTGGGACGTTACAACAGTGGAGATGAAGATAATGTCACGCAGGTTCGTACCTTCTACACTCAGGTGCTGAACAAAGAAGAACGCCAGAGACTTTGCCAGAACATGGCGGGAGCCCTGAAGGGAGCCCAGCTCTTCATCCAGAAACGCATGGTGGAGAACTTGAAGGCAGTCCATCCAGACTATGGAAACAGTGTTCAGACCCTTCTCGACAAGTACAATGCAGACGCCCAGAAGAACACAAACGTTCATGTTTACAGCCGTCCAGGAGCCTCAGCTGTTGCTGCGTCCTCAAAGATGTGA
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4楼2015-08-06 12:36:44
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