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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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shadowing520

新虫 (初入文坛)

[求助] 求引物设计大神 已有1人参与

实验菜鸟,下面这段CDS序列需要扩全序列,但是引物总设计不好,用primer5设计分数不高,求各位大神帮忙设计下,万分感谢~~~~~~~~~~~~~
ATGCCTGTCACTTTTGATCAAGAACGCTATAATGTGTCTGTACCGTTTTCGACAGGTATTCACGGATTATCTGATGGCCATGGGATTCGAATTGTGGCAGTGCCAAAACATGGCGGGACGCTATTTACAGTGAATCTACGACGTGGTGACGATATTTATTTCCACTTCAATCCGCGCTTTAATCAAGGAGTAGTGGTGATGAACTGCGAAATTGGCGGCGCATGGCAACATGAAGAGTACATCGATCCCATTCCATTCACCGACTGCAAGCTGTTCACACTTGATCTCGTCTCCATTAATGGATCAGTCGAGATTGTCATTGATGGTGAACAACGAGGACGTTTCAGAATCCGTGAAGATCTGCGTCATGTGGATCGTTTTGAAGTGGACGGCGATGTAGAAGTTCATTCAGTTCATTATGGTGTTTGA
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zjqfjj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-06 11:54:39
你这个因为要扩全长,位置其实没什么余地,只能通过调整上下游引物的长度尽量使Tm值接近就好,如果要构建相应表达载体,自己根据该基因酶切位点信息、载体酶切位点信息选择在引物前加酶切位点。F:ATGCCTGTCACTTTTGA ...

能帮我设计一下这个引物吗,序列长度需要选择在100——300,万分感谢
ATGGCTGACAACAGAGATAAAACCACGGACCAGATGAAGATGTGGAAGGAGGGCCGTGGAGCTCAGAGGGCTGACAAGCTGACCACAGGGGCTGGCCATCCCATTGGAGACAAGCTGAACCTGCAGACTGCAGGTCCCAGGGGTCCTCTGCTGGTCCAAGATGTGGTCTTCACAGATGAGATGGCCCACTTCGACAGGGAACGAATTCCAGAGAGAGTGGTGCACGCCAAAGGGGCAGGGGCATTTGGCTACTTTGAGGTGACTCACGACATCAGTCGTTACTGCAAGGCCAAGGTGTTTGAGCACATCGGCAAGACTACGCCCATTGCTGTTCGCTTCTCCACTGTGGCCGGTGAATCGGGATCAGCTGACACTGTGCGAGACCCCCGAGGCTTTGCAGTCAAGTTTTACACTGAGGGTGGCAACTGGGACCTGACGGGCAACAACACCCCCATTTTCTTCATCAGGGACGCTCTACTGTTCCCGTCCTTCATCCACTCCCAGAAGCGTAATCCTCAAACCCACATGAAAGACCCTGACATGGTGTGGGACTTCTGGAGCCTGAGGCCAGAGAGTCTGCATCAGGTGTCCTTCTTGTTCAGCGATCGAGGTTTGCCCGACGGCTACCGTCACATGAACGGCTACGGCTCTCATACCTTCAAACTGGTCAACAGCAACGGCGAGCGCTTCTACTGCAAGTTCCACTACAAAACTGATCAAGGAATAAAGAATCTGCCGGTTGAGGAGGCAGACCGCCTGGCTTCCACCAACCCAGATTATGCCATCGGAGACTTGTTTAACGCCATTGCCAATGGGAACTTCCCGTCCTGGACTTTCTACATCCAGGTTATGACCTTTGAGCAGGCTGAGAAGTTCCAGTTCAACCCATTCGATCTTACCAAGGTTTGGTCACACAAAGAATACCCTTTGATCCCTGTGGGCAAAATGGTGCTGAACAGGAACCCAGTCAACTACTTTGCAGAGGTGGAGCAGCTGGCCTTTGACCCCAGCAACATGCCACCAGGCATCGAGCCAAGCCCTGACAAGATGCTGCAGGGTCGCCTCTTCTCCTACCCAGACACGCATCGACACCGTCTGGGAGCCAACTACCTGCAGCTCCCTGTCAACTGCCCCTTCAGGGCCCGCGTGGCCAACTACCAGCGCGATGGTCCTATGTGCATGTTTGACAACCAAGGTGGAGCTCCAAACTACTATCCAAACAGCTTCAGTGCCCCGGAGACCCAGCCTCAGTTTATGGAGTCCAAGTTCAGCGTGTCTCCAGATGTGGGACGTTACAACAGTGGAGATGAAGATAATGTCACGCAGGTTCGTACCTTCTACACTCAGGTGCTGAACAAAGAAGAACGCCAGAGACTTTGCCAGAACATGGCGGGAGCCCTGAAGGGAGCCCAGCTCTTCATCCAGAAACGCATGGTGGAGAACTTGAAGGCAGTCCATCCAGACTATGGAAACAGTGTTCAGACCCTTCTCGACAAGTACAATGCAGACGCCCAGAAGAACACAAACGTTCATGTTTACAGCCGTCCAGGAGCCTCAGCTGTTGCTGCGTCCTCAAAGATGTGA
4楼2015-08-06 12:36:44
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
shadowing520: 金币+5, 有帮助 2015-08-06 16:08:25
你这个因为要扩全长,位置其实没什么余地,只能通过调整上下游引物的长度尽量使Tm值接近就好,如果要构建相应表达载体,自己根据该基因酶切位点信息、载体酶切位点信息选择在引物前加酶切位点。F:ATGCCTGTCACTTTTGATCAAGAAC
R:TCAAACACCATAATGAACTGAATGAAC
2楼2015-08-06 11:54:39
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zjqfjj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-06 11:54:39
你这个因为要扩全长,位置其实没什么余地,只能通过调整上下游引物的长度尽量使Tm值接近就好,如果要构建相应表达载体,自己根据该基因酶切位点信息、载体酶切位点信息选择在引物前加酶切位点。F:ATGCCTGTCACTTTTGA ...

F和R有什么区别
3楼2015-08-06 12:14:17
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by zjqfjj at 2015-08-06 12:14:17
F和R有什么区别...

F(forward):上游引物,R(reverse):下游引物
5楼2015-08-06 12:50:45
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