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蝎子熊

金虫 (小有名气)

[求助] 定量PCR问题!!求助 已有4人参与

如题:
好多定量的试剂盒,给出的PCR条件,在第二大步进行循环的时候,往往只有变性,和退火,没有延伸!这是为什么??因为目的片段不大,所以这样子?但是往往在文献的方法里,在循环里都会有72度延伸这一步? 请教明白的人给解答。
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科研搞不好罢了,身体一定要锻炼好~
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许彦

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

试剂盒里面是把退火延伸和在一步了,一般都是片段很小

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2015-08-07 15:51:55
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查看全部 9 个回答

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
蝎子熊: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-08-04 11:28:44
PCR有两步法和三步法,两步法PCR把退火和延伸合并了而已
试剂盒说明书怎么写,你就怎么设
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2015-08-04 11:26:41
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蝎子熊

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-08-04 11:26:41
PCR有两步法和三步法,两步法PCR把退火和延伸合并了而已
试剂盒说明书怎么写,你就怎么设

我看文献大多是3步法,而试剂盒一般2步法,做得时候哪个作为重点参照呢?
科研搞不好罢了,身体一定要锻炼好~
3楼2015-08-04 11:29:38
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柒筱六

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 蝎子熊 at 2015-08-04 11:29:38
我看文献大多是3步法,而试剂盒一般2步法,做得时候哪个作为重点参照呢?...

用试剂盒提,按照试剂盒要求设条件就可以了
4楼2015-08-04 13:59:39
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