应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 定量PCR问题！！求助
81/1返回列表
查看: 1631  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

蝎子熊

金虫 (小有名气)

[求助] 定量PCR问题！！求助 已有4人参与

如题：
好多定量的试剂盒，给出的PCR条件，在第二大步进行循环的时候，往往只有变性，和退火，没有延伸！这是为什么？？因为目的片段不大，所以这样子？但是往往在文献的方法里，在循环里都会有72度延伸这一步？ 请教明白的人给解答。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

QPCR的学习资料

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
科研搞不好罢了，身体一定要锻炼好~
1楼 2015-08-04 11:10:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
蝎子熊: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-08-04 11:28:44
PCR有两步法和三步法，两步法PCR把退火和延伸合并了而已
试剂盒说明书怎么写，你就怎么设
赞一下(1人) 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2015-08-04 11:26:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蝎子熊

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-08-04 11:26:41
PCR有两步法和三步法，两步法PCR把退火和延伸合并了而已
试剂盒说明书怎么写，你就怎么设

我看文献大多是3步法，而试剂盒一般2步法，做得时候哪个作为重点参照呢？
赞一下 回复此楼
科研搞不好罢了，身体一定要锻炼好~
3楼2015-08-04 11:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柒筱六

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蝎子熊 at 2015-08-04 11:29:38
我看文献大多是3步法，而试剂盒一般2步法，做得时候哪个作为重点参照呢？...

用试剂盒提，按照试剂盒要求设条件就可以了
赞一下 回复此楼
4楼2015-08-04 13:59:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivd娟

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

按照试剂盒说明来提
赞一下 回复此楼
5楼2015-08-07 15:39:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

试剂盒里面是把退火延伸和在一步了，一般都是片段很小

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
6楼2015-08-07 15:51:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天秤座的女孩

铜虫 (初入文坛)
在退火温度与延伸温度接近或相同的时候，往往把二者合并为一步，把时间加长些，即所谓的两步PCR。
赞一下 回复此楼
7楼2015-08-18 19:05:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangying67

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

跑上一个孔看看，哪个效果好，那个曲线比较陡，哪个起跳早
赞一下 回复此楼
8楼2015-08-19 08:17:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蝎子熊 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 急需审稿人！！！ +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 8/400 2026-04-21 16:26 by 啃面包的小书虫
[考研] 一志愿A区211，22408 321求调剂 +7 随心所欲☆ 2026-04-15 8/400 2026-04-21 08:22 by Equinoxhua
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 一志愿中科大材料与化工，353分还有调剂学校吗 +11 否极泰来2026 2026-04-15 13/650 2026-04-20 22:31 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +4 yexuqing 2026-04-19 4/200 2026-04-20 14:47 by brantleo
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 294求调剂 +15 淡然654321 2026-04-15 15/750 2026-04-19 08:20 by cuisz
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[考研] 一志愿沪9，生物学326求调剂 +9 刘墨墨 2026-04-15 9/450 2026-04-16 17:14 by 崔崔崔cccc
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭