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LiuMengTan金虫 (小有名气)
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求助液相色谱梯度洗脱方法调整的问题 已有1人参与
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请教一个HPLC的梯度洗脱问题：缓冲盐是20mmol/L的醋酸铵-醋酸缓冲盐溶液，pH=4.90。 原来的方法 0 min 100% 醋酸铵缓冲盐 2.5 min 100% 醋酸铵缓冲盐 10 min 36% 甲醇 64% 醋酸铵缓冲盐 12.5 min 100% 醋酸铵缓冲盐 15 min 100% 醋酸铵缓冲盐 原来可以检测出五种物质，出峰时间分别是2.33 2.67 5.46 6.45 10.88 min 但是现在我只想检测两种物质（2.67 和5.46两个峰），虽然可以直接跑完这个梯度，但是比较费时间，希望调整后可以节省点分析时间。另外峰谱图后半部分基线漂移比较严重，所以想着调整本方法～ 请教一下梯度洗脱的方法应该怎么修改呢？有一个不明白的问题是怎么调整有机相比例可以避免后面不需要的几种物质残留在色谱柱中？ [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
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LiuMengTan
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9楼2015-08-04 13:16:08
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1.15min的分析方法还想怎样？120min的方法你说分析时间长，想调短一点，我觉得还是有意义的，15min的方法就算你再怎么优化，10min总要吧，节约这5min意义真不大。 2.后半部是回梯度时间，基线丑，漂移都没关系，反正那边的所有峰都是空白，不带入计算的。 3.如果你非要调整，把10改成7，12.5改成8,15改成12试一试。要注意5.4和6.4这两个峰能不能分开。 |
2楼2015-08-03 14:41:36
LiuMengTan
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