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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 紧急求助，液相色谱C18柱基线不平，出现鬼峰
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dolphin4283

铜虫 (初入文坛)

[求助] 紧急求助，液相色谱C18柱基线不平，出现鬼峰 已有10人参与

之前一直用一个方法检测EGCG的含量，出了出峰时间随着测量次数增加逐渐延长以外也没出现别的什么问题；但是自7月入夏后，再用这种方法检测EGCG含量，基线就不再平了，一直出现鬼峰，如下图：
紧急求助，液相色谱C18柱基线不平，出现鬼峰
之前的图谱4月时：
紧急求助，液相色谱C18柱基线不平，出现鬼峰-1
6月时：
紧急求助，液相色谱C18柱基线不平，出现鬼峰-2
我的方法是B相：0.1%甲酸-甲醇，C相：0.1%磷酸-水， 柱温30度；样品槽25度。 梯度洗脱0到2min，18%B、82%C；2到10min，由18%B、82%C变为50%B、50%C；10到11分半，维持50%B、50%C；11分半到13min，由50%B、50%C18变为%B、82%C，维持2min，结束。之后用初始流动相比例跑基线卸柱。

想问下为何7月后会出现鬼峰，最近2天在跑基线，但是怎么也跑不平，波动很大，已经跑了2天了仍旧是这个样子，想问下这究竟是温度的原因，还是柱效已经不行了，或者是柱子太脏，继续冲会好吗？  求大神相教，谢谢各位帮助！
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1楼 2015-08-11 18:46:17
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wangzhixia1

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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dolphin4283: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-08-13 18:16:28
我想问一下，你都不洗柱吗，单纯用你的流动相平衡柱子，那不是色谱柱一直在酸性条件下储存了。一直这样色谱柱肯定会很脏吧，而且这样也很容易长菌的吧。我们都会用甲醇-水体系洗柱的。
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相信自己
2楼2015-08-11 20:26:30
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ethernet3399

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
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判断一下鬼峰从哪里来的，比如不进样，后者进样空白甲醇，有没有。你的方法只洗脱到50%，有可能样品中小极性杂质没有洗脱干净。如果判断是柱子被污染，可以用乙腈等冲洗

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5楼2015-08-12 06:23:44
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普通回帖

匿名

用户注销 (知名作家)

精修问题可私信
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3楼2015-08-11 21:29:52
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jingjia2006

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议用甲醇，水洗柱子，或换保护柱芯

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4楼2015-08-11 21:56:48
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YBFXXY

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看情况是柱子脏了的可能性大些，建议连管路用甲醇水系统多冲冲，平常用完柱子最好用甲醇水系统冲个半个来小时，包括所有管路，所有通道，当然了是你用过的含酸的通道，顺便问一句你柱子pH适用范围是多少？

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6楼2015-08-12 07:03:26
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匿名

禁虫 (知名作家)
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7楼2015-08-12 07:29:44
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19890218

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把开机方法说一下，大家一起分析分析

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我是植保人，我奋发昂扬；我是植保人，我将铸就辉煌。
8楼2015-08-12 07:37:28
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xuchao7447

木虫 (著名写手)

超

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
柱子保存不当，你这个在80%以上的水相中保存这么长时间，长一点脏东西很正常，而且还是保存在酸性溶液中，不排除柱子本身已经有很大的损伤了！建议多洗洗
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生活就是如此
9楼2015-08-12 09:13:09
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yan1984

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换个色谱柱确认下是不是色谱柱的问题，如果换了色谱柱结果好些但没完全解决的话那就冲洗仪器看看。
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10楼2015-08-12 19:24:26
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