24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2209  |  回复: 8

LiuMengTan

金虫 (小有名气)

[求助] 求助液相色谱梯度洗脱方法调整的问题 已有1人参与

请教一个HPLC的梯度洗脱问题:缓冲盐是20mmol/L的醋酸铵-醋酸缓冲盐溶液,pH=4.90。
原来的方法
0 min  100% 醋酸铵缓冲盐
2.5 min 100% 醋酸铵缓冲盐
10 min 36% 甲醇  64% 醋酸铵缓冲盐
12.5 min 100% 醋酸铵缓冲盐
15 min 100% 醋酸铵缓冲盐
原来可以检测出五种物质,出峰时间分别是2.33 2.67 5.46 6.45 10.88 min
但是现在我只想检测两种物质(2.67 和5.46两个峰),虽然可以直接跑完这个梯度,但是比较费时间,希望调整后可以节省点分析时间。另外峰谱图后半部分基线漂移比较严重,所以想着调整本方法~
请教一下梯度洗脱的方法应该怎么修改呢?有一个不明白的问题是怎么调整有机相比例可以避免后面不需要的几种物质残留在色谱柱中?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
LiuMengTan: 金币+8, ★★★很有帮助, 非常感谢! 2015-08-03 14:45:29
LiuMengTan: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2015-08-03 14:51:51
1.15min的分析方法还想怎样?120min的方法你说分析时间长,想调短一点,我觉得还是有意义的,15min的方法就算你再怎么优化,10min总要吧,节约这5min意义真不大。
2.后半部是回梯度时间,基线丑,漂移都没关系,反正那边的所有峰都是空白,不带入计算的。
3.如果你非要调整,把10改成7,12.5改成8,15改成12试一试。要注意5.4和6.4这两个峰能不能分开。
铁甲依然在
2楼2015-08-03 14:41:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LiuMengTan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 赈早见琥珀主 at 2015-08-03 14:41:36
1.15min的分析方法还想怎样?120min的方法你说分析时间长,想调短一点,我觉得还是有意义的,15min的方法就算你再怎么优化,10min总要吧,节约这5min意义真不大。
2.后半部是回梯度时间,基线丑,漂移都没关系,反 ...

好的,我明白了,只是想问问是否有更好的方法?因为觉得后面的没必要,后半部分柱压高了,基线漂了,又没有目标物质,所以才想问问。听您这么一说好像是多此一举,谢谢哈~
3楼2015-08-03 14:47:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by LiuMengTan at 2015-08-03 14:47:03
好的,我明白了,只是想问问是否有更好的方法?因为觉得后面的没必要,后半部分柱压高了,基线漂了,又没有目标物质,所以才想问问。听您这么一说好像是多此一举,谢谢哈~...

后半部回梯度是为了保证进下一针的时候有个比较平的基线
铁甲依然在
4楼2015-08-03 14:48:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LiuMengTan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 赈早见琥珀主 at 2015-08-03 14:48:51
后半部回梯度是为了保证进下一针的时候有个比较平的基线...

嗯嗯,明白了。那看来前后平衡的时间省不了那就真没必要再调整了。谢谢哈~学习了!
5楼2015-08-03 14:52:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

da1234mao

铁虫 (著名写手)

等比例走到6分钟就不要了,
0 min  100% 醋酸铵缓冲盐
2.5 min 100% 醋酸铵缓冲盐
6 min 16.8% 甲醇
6楼2015-08-04 08:45:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LiuMengTan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by da1234mao at 2015-08-04 08:45:29
等比例走到6分钟就不要了,
0 min  100% 醋酸铵缓冲盐
2.5 min 100% 醋酸铵缓冲盐
6 min 16.8% 甲醇

这样的话我样品里面其他几种物质怎么办?会不会残留在色谱柱里面呢?比较担心影响色谱柱寿命

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-08-04 12:13:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

da1234mao

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by LiuMengTan at 2015-08-04 12:13:01
这样的话我样品里面其他几种物质怎么办?会不会残留在色谱柱里面呢?比较担心影响色谱柱寿命
...

最后来个后运行,冲柱啊
8楼2015-08-04 12:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LiuMengTan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by da1234mao at 2015-08-04 12:40:58
最后来个后运行,冲柱啊...

冲柱的话设置什么比例,需要多长时间?

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2015-08-04 13:16:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 LiuMengTan 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +8 关忆北. 2026-04-11 8/400 2026-04-12 09:32 by 逆水乘风
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 22专硕求调剂 +6 haoyun上岸 2026-04-11 8/400 2026-04-11 23:21 by labixiaoqiao
[考研] 考研求调剂 +3 ban班小七 2026-04-11 3/150 2026-04-11 20:48 by may_新宇
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 293求调剂 +6 勇远库爱314 2026-04-08 6/300 2026-04-11 10:08 by zhq0425
[考研] 化学工程与技术324调剂 +23 孙常华 2026-04-09 25/1250 2026-04-11 00:07 by 骑牛渡寒江
[考研] 一志愿京区985,085401,与本科专业一致,电子信息工程, +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[考研] 273求调剂 +51 麦小叮当 2026-04-06 58/2900 2026-04-10 15:54 by jiajinhpu
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 一志愿华工085600 331分 +6 天下ww 2026-04-09 6/300 2026-04-09 18:59 by l_paradox
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
[考研] 材料调剂 +10 18815505510 2026-04-09 11/550 2026-04-09 17:07 by 544594351
[考研] 085400电子信息类(川大控制工程)求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +24 额cc 2026-04-06 25/1250 2026-04-09 16:01 by wp06
[考研] 机械工程313分找工科调剂 +3 双一流本科机械 2026-04-08 3/150 2026-04-08 20:41 by 土木硕士招生
[考研] 求调剂 +15 熊二想上岸 2026-04-06 15/750 2026-04-08 04:53 by 无际的草原
[考研] 313求调剂 +3 十六拾陆 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:20 by lbsjt
[考研] 11408 325分 +3 jgtxuxgkx 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:10 by lbsjt
信息提示
请填处理意见