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Aminah_ma

木虫 (小有名气)

[求助] 求助各位大神,液相色谱峰分不开!怎么办???已有7人参与

万能的小木虫,帮帮我吧!
本人最近做一中药制剂,主成分是黄酮类,现在正摸索液相条件。
流动相:乙腈:甲醇=9:1,0.3%甲酸水溶液(B)
梯度洗脱,0-15min:  82-80(B)
                15-25min:80-79 (B)            
                 25-30min:79-78(B)
                 30-32min: 78(B)
峰集中在25到30分钟出峰,无法分离,请大家帮忙啊!!
色谱峰见下图:

中间的色谱峰为想要的物质。

求助各位大神,液相色谱峰分不开!怎么办???
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)

怎么没有人帮我???急等啊
2楼2015-01-31 09:28:45
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)

自己顶!
3楼2015-01-31 09:34:12
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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Aminah_ma: 金币+5 2015-02-06 16:02:35
分离不建议这么复杂的梯度洗脱,直接等度洗就可以,用乙腈-水,甲醇水系统试试  祝好
Domyallbesttohaveahappylife.
4楼2015-01-31 09:42:11
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2015-01-31 09:42:11
分离不建议这么复杂的梯度洗脱,直接等度洗就可以,用乙腈-水,甲醇水系统试试  祝好

这个梯度在别人的实验室已经验证过,分离度很好,到我这边就不行,柱子是同一厂家同一型号,那边是安捷伦的液相,我这边是岛津的,差别好大·········
5楼2015-01-31 10:23:56
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主

引用回帖:
5楼: Originally posted by Aminah_ma at 2015-01-31 10:23:56
这个梯度在别人的实验室已经验证过,分离度很好,到我这边就不行,柱子是同一厂家同一型号,那边是安捷伦的液相,我这边是岛津的,差别好大·········...

是不是浓度太大?
Domyallbesttohaveahappylife.
6楼2015-01-31 10:34:40
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Aminah_ma: 金币+2 2015-02-06 16:02:50
注意色谱柱清洗,平衡,

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2015-01-31 10:53:21
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2015-01-31 10:34:40
是不是浓度太大?...

样品的制备过程也一样,进样量也是一样的,在别人实验室,对照品在水相82%出峰,在我这边,水相78-79%之间出峰,还分不开,我这边没有柱温箱,室温20℃,但温度影响不应该这么大
8楼2015-01-31 11:10:54
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zw0123456789zw at 2015-01-31 10:53:21
注意色谱柱清洗,平衡,

每天都要仔细清洗色谱柱,平衡也很长时间才进样的
9楼2015-01-31 11:11:47
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yijuyang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Aminah_ma: 金币+2 2015-02-06 16:04:24
是不是你用的柱已经老化了呢?如果不是这个原因的话,可以尝试在现在程序上,调整程序加大水相量。
季老说过”真话不全说,假话全不说“。
10楼2015-01-31 11:27:33
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