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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助各位大神，液相色谱峰分不开！怎么办？？？
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)

[求助] 求助各位大神，液相色谱峰分不开！怎么办？？？ 已有7人参与

万能的小木虫，帮帮我吧！
本人最近做一中药制剂，主成分是黄酮类，现在正摸索液相条件。
流动相：乙腈：甲醇=9：1，0.3%甲酸水溶液(B)
梯度洗脱，0-15min:  82-80(B)
                15-25min:80-79 (B)            
                 25-30min:79-78(B)
                 30-32min: 78(B)
峰集中在25到30分钟出峰，无法分离，请大家帮忙啊！！
色谱峰见下图：

中间的色谱峰为想要的物质。

求助各位大神，液相色谱峰分不开！怎么办？？？
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1楼 2015-01-30 23:26:46
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)
怎么没有人帮我？？？急等啊
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2楼2015-01-31 09:28:45
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)
自己顶！
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3楼2015-01-31 09:34:12
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Aminah_ma: 金币+5 2015-02-06 16:02:35
分离不建议这么复杂的梯度洗脱，直接等度洗就可以，用乙腈-水，甲醇水系统试试  祝好
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Domyallbesttohaveahappylife.
4楼2015-01-31 09:42:11
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2015-01-31 09:42:11
分离不建议这么复杂的梯度洗脱，直接等度洗就可以，用乙腈-水，甲醇水系统试试  祝好

这个梯度在别人的实验室已经验证过，分离度很好，到我这边就不行，柱子是同一厂家同一型号，那边是安捷伦的液相，我这边是岛津的，差别好大·········
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5楼2015-01-31 10:23:56
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by Aminah_ma at 2015-01-31 10:23:56
这个梯度在别人的实验室已经验证过，分离度很好，到我这边就不行，柱子是同一厂家同一型号，那边是安捷伦的液相，我这边是岛津的，差别好大·········...

是不是浓度太大？
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Domyallbesttohaveahappylife.
6楼2015-01-31 10:34:40
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Aminah_ma: 金币+2 2015-02-06 16:02:50
注意色谱柱清洗，平衡，

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2015-01-31 10:53:21
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2015-01-31 10:34:40
是不是浓度太大？...

样品的制备过程也一样，进样量也是一样的，在别人实验室，对照品在水相82%出峰，在我这边，水相78-79%之间出峰，还分不开，我这边没有柱温箱，室温20℃，但温度影响不应该这么大
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8楼2015-01-31 11:10:54
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Aminah_ma

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zw0123456789zw at 2015-01-31 10:53:21
注意色谱柱清洗，平衡，

每天都要仔细清洗色谱柱，平衡也很长时间才进样的
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9楼2015-01-31 11:11:47
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yijuyang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Aminah_ma: 金币+2 2015-02-06 16:04:24
是不是你用的柱已经老化了呢？如果不是这个原因的话，可以尝试在现在程序上，调整程序加大水相量。
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季老说过”真话不全说，假话全不说“。
10楼2015-01-31 11:27:33
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