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翯翯清秋

木虫 (小有名气)

[求助] 求助液相色谱的离子对试剂 已有1人参与

各位大神  恳请帮助
最近在做反向离子对色谱
看到文献上说柱子做过离子对之后至少要冲一个小时以上
我的实验需要优化离子对试剂的浓度,做完一种浓度而后做下一个浓度之间也要冲洗这么久吗?

另外,水相原本是乙酸-乙酸铵的缓冲溶液(均0.1M),而离子对可能会对流动相的pH稍有影响,需要在配制完不同浓度含离子对试剂的缓冲液后调整pH吗?

越做实验越来越发现色谱知识博大精深啊,自己才只是学了个皮毛而已,求各位大神慷慨帮助,不胜感激!
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ajshen

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
翯翯清秋: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-07-15 20:33:12
连续优化离子对试剂的浓度不需要冲洗1 h的,柱子用过离子对试剂之后,比较难冲洗干净,才用长时间冲洗。但是一般用过离子对试剂的柱子就专门用来做离子对色谱了。
缓冲体系在其缓冲范围之内,一般不需要重新调节pH值的。
JESSICA
2楼2014-07-11 09:00:08
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翯翯清秋

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ajshen at 2014-07-11 09:00:08
连续优化离子对试剂的浓度不需要冲洗1 h的,柱子用过离子对试剂之后,比较难冲洗干净,才用长时间冲洗。但是一般用过离子对试剂的柱子就专门用来做离子对色谱了。
缓冲体系在其缓冲范围之内,一般不需要重新调节pH ...

您说的很对
我配好后测试了pH值,没有发生变化

请教一下,您一般离子对试剂的流动相平衡柱子多久呢?我做离子对试剂的种类和浓度优化,每变化一次条件都要重新平衡很久吗?

感谢您的帮助!
3楼2014-07-12 19:52:43
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ajshen

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 翯翯清秋 at 2014-07-12 19:52:43
您说的很对
我配好后测试了pH值,没有发生变化

请教一下,您一般离子对试剂的流动相平衡柱子多久呢?我做离子对试剂的种类和浓度优化,每变化一次条件都要重新平衡很久吗?

感谢您的帮助!...

一般来讲需要比正常的反相色谱平衡时间至少长一倍~150 mm柱子至少30 min。如果是换离子对试剂种类的话,重新平衡也需要30 min以上。同样的离子对试剂仅仅是浓度改变的话,可以适当减短一点~
JESSICA
4楼2014-07-17 09:26:55
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沸沸27

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ajshen at 2014-07-11 09:00:08
连续优化离子对试剂的浓度不需要冲洗1 h的,柱子用过离子对试剂之后,比较难冲洗干净,才用长时间冲洗。但是一般用过离子对试剂的柱子就专门用来做离子对色谱了。
缓冲体系在其缓冲范围之内,一般不需要重新调节pH ...

您的意思是进了离子对试剂对柱子的影响很大吗?如果我要做两个体系,一个需要离子对试剂,这样交叉做,会对我的另个体系有影响吗?
5楼2015-01-18 23:40:12
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