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lnn0413

金虫 (正式写手)

[求助] C18柱流动相用过离子对试剂之后,柱子就废了吗?已有9人参与

刚买的一根C18柱,流动相中含有离子对试剂1-己烷磺酸钠,pH值2.5。之后另一种方法也是缓冲盐,pH 6.6。用过这两次之后主峰总是出肩峰,请问这样话,柱子还能冲出来吗?用异丙醇冲半个小时的话可以把己烷磺酸钠冲出来吗?
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志存高远,脚踏实地。
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lnn0413

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by e_liang369 at 2014-04-29 12:30:16
盐怎么能用纯有机溶剂冲洗,估计是被你冲坏的

先用10%的甲醇水冲40-60min,把缓冲盐冲出来,然后用异丙醇冲洗吸附在里面的己烷磺酸钠。
志存高远,脚踏实地。
3楼2014-04-29 12:46:06
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lnn0413: 金币+1 2014-04-29 14:54:50
盐怎么能用纯有机溶剂冲洗,估计是被你冲坏的
悲催的研发!
2楼2014-04-29 12:30:16
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e_liang369

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lnn0413 at 2014-04-29 12:46:06
先用10%的甲醇水冲40-60min,把缓冲盐冲出来,然后用异丙醇冲洗吸附在里面的己烷磺酸钠。...

离子对试剂你用10%的甲醇冲的时间太短,盐怎能用纯有机相去冲洗,一般是用水相冲洗足够时间,再最好走个梯度,有机相比例逐步提高来冲洗色谱柱
悲催的研发!
6楼2014-04-29 14:49:12
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海风^_^

木虫 (正式写手)

海风

引用回帖:
7楼: Originally posted by lnn0413 at 2014-04-29 14:54:17
请问大约多长时间呢?...

我们是过夜冲洗的,总共200分钟差不多
Afterall,tomorrowisanotherday!
10楼2014-04-29 15:30:02
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……


费姚永芬: 金币+1, 欢迎常来分析版交流 2014-04-30 12:31:10
引用回帖:
16楼: Originally posted by lnn0413 at 2014-04-30 08:42:49
好的,谢谢!
请问,如果是柱头塌陷的话,是什么原因引起的呢?柱压太高吗,大约多大的压力能把柱头压塌?还有什么可能的原因呢?...

压力突变,另外流动相极端pH值条件
人生若只如初见...
17楼2014-04-30 09:48:15
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普通回帖

lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lnn0413: 金币+1 2014-04-29 14:51:43
基本冲不出来了 楼主咋能拿新柱子上离子对呢? 这样很烧柱子了 看100%乙腈冲的出来不
4楼2014-04-29 12:58:25
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海风^_^

木虫 (正式写手)

海风

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lnn0413: 金币+1 2014-04-29 14:53:11
首先碳18的柱子用离子对试剂肯定是没有问题的,我们实验室经常用。你先用了低浓度的甲醇这没错,但是时间有点短,要多冲洗一段时间。后面用异丙醇有点欠妥,我们实验室是低浓度甲醇后再高浓度甲醇,两阶段时间都要长一些。
Afterall,tomorrowisanotherday!
5楼2014-04-29 13:24:01
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lnn0413

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 海风^_^ at 2014-04-29 13:24:01
首先碳18的柱子用离子对试剂肯定是没有问题的,我们实验室经常用。你先用了低浓度的甲醇这没错,但是时间有点短,要多冲洗一段时间。后面用异丙醇有点欠妥,我们实验室是低浓度甲醇后再高浓度甲醇,两阶段时间都要长 ...

请问大约多长时间呢?
志存高远,脚踏实地。
7楼2014-04-29 14:54:17
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lnn0413

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lifucheng at 2014-04-29 12:58:25
基本冲不出来了 楼主咋能拿新柱子上离子对呢? 这样很烧柱子了 看100%乙腈冲的出来不

请问乙腈比异丙醇的洗脱能力效果要好吗?
志存高远,脚踏实地。
8楼2014-04-29 14:56:50
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lnn0413

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lifucheng at 2014-04-29 12:58:25
基本冲不出来了 楼主咋能拿新柱子上离子对呢? 这样很烧柱子了 看100%乙腈冲的出来不

补充问一下,现在的情况是,色谱图的主峰总是出现肩峰,是不是说明柱子还没冲好呢?还是什么其他的原因呢,非常感谢!
志存高远,脚踏实地。
9楼2014-04-29 15:02:42
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