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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取为什么浓度不高
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dd812007135

木虫 (正式写手)

[求助] 质粒提取为什么浓度不高 已有10人参与

我是用Endo-free plasmid Mini KitⅡ抽取质粒的，用了50ml的培养液过夜培养大肠杆菌，第二天抽取后发现浓度只有60ng/ml,浓度低的原因到底是什么呢？
第一次离心后发现菌体沉淀很多，我就把SOlution1,solution2 加大了一倍，这样可以吗？
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1楼 2015-07-29 20:57:34
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哎呀那个雨

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-30 23:23:50
dd812007135: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-07-31 10:52:40
你提的浓度太低啦，我最高提过1000ng/ul，也是Endo-Free,你是不是把试剂加错了，再仔细检查一下protol
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啊
4楼2015-07-30 19:58:18
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jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
三个溶液都加大一倍，没有问题

[ 发自小木虫客户端 ]
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借口很贱，，，
2楼2015-07-29 21:45:10
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dd812007135

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jonew at 2015-07-29 21:45:10
三个溶液都加大一倍，没有问题

如果裂解液加大一倍，是不是后续步骤的试剂也要加大一倍
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3楼2015-07-29 22:48:06
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dd812007135

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 哎呀那个雨 at 2015-07-30 19:58:18
你提的浓度太低啦，我最高提过1000ng/ul，也是Endo-Free,你是不是把试剂加错了，再仔细检查一下protol

不知道是不是大肠杆菌里面的这个质粒是低拷贝，我每次培养大肠杆菌都是一下培养20ml,这个会不会太多呢？
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5楼2015-07-31 10:52:17
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