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hgch

新虫 (初入文坛)

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[求助] 碱法提质粒遇到的问题

如上所述，本人用AxyPrep质粒DNA小量试剂盒，加入试剂三之后，有不少沉淀产生，但用12000g离心10分钟，发现沉淀是悬浮的，再离心也离心不下去，这样不好取上清了，不知道这是为什么，请大侠赐教！
还有就是每次小量提取质粒得到的量很少，一个1.5ml EP管最后只加20ul水，浓度只有40-50 ng/ul，怎么提高质粒的量呢？

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1楼 2013-05-17 14:15:42

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xulinan

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

一般情形12000g 5min是足够离下去的，10min都离不下去没遇到过，坐等高手吧，估计也不可能是溶液保存不当失效的问题吧？
关于浓度的问题可以给你个建议，把菌量加大，可以用3-4.5ml，如果提高了还是不好使的话，那多半是试剂盒的问题了，比如溶液失效（特别是溶液2）或本身这个试剂盒就一般（原来用过一个试剂盒就无论如何浓度都低）

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2楼2013-05-17 20:56:00

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