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关于碱法提质粒时的问题
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| 最近做碱法提质粒过程中,平衡酚被氧化了,成红色,这对所提的质粒有什么影响?琼脂糖电泳出现的拖尾是否是由这造成的?不用酚,只用氯仿异戊醇可不可以??请大家指教,谢谢~\(≧▽≦)/~啦啦啦!!! |
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starseacow
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看天: 金币+4, BioEPI+1, 鼓励回答 2012-07-20 00:42:49
蝶舞清池: 金币+20, ★★★很有帮助 2012-07-20 16:22:17
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| 提质粒时使用酚,主要目的是变性蛋白,但酚与水有一定互溶,因此需用水饱和酚。酚如果被氧化,容易降解DNA,楼主在电泳中看到的拖尾可能与此有关,粉红色的酚不要使用了。由于氯仿本身也有变性蛋白作用,因此仅使用氯仿:异戊醇24:1也可以(我们实验室就是用这种配方),抽提蛋白效果会有一点下降。 |
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2楼2012-07-19 22:54:35
nmhsd
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castlered
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蝶舞清池