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hgch

新虫 (初入文坛)

[求助] 碱法提质粒遇到的问题

如上所述,本人用AxyPrep质粒DNA小量试剂盒,加入试剂三之后,有不少沉淀产生,但用12000g离心10分钟,发现沉淀是悬浮的,再离心也离心不下去,这样不好取上清了,不知道这是为什么,请大侠赐教!
还有就是每次小量提取质粒得到的量很少,一个1.5ml EP管最后只加20ul水,浓度只有40-50 ng/ul,怎么提高质粒的量呢?
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xulinan

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般情形12000g  5min是足够离下去的,10min都离不下去没遇到过,坐等高手吧,估计也不可能是溶液保存不当失效的问题吧?
关于浓度的问题可以给你个建议,把菌量加大,可以用3-4.5ml,如果提高了还是不好使的话,那多半是试剂盒的问题了,比如溶液失效(特别是溶液2)或本身这个试剂盒就一般(原来用过一个试剂盒就无论如何浓度都低)
2楼2013-05-17 20:56:00
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