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99蜗牛99

新虫 (小有名气)

[交流] 求助！！载体上和目的基因上都有启动子和终止子

求助！！载体上有启动子和终止子，目的基因序列上也有启动子和终止子，需要把目的基因上的启动子和终止子都去掉吗，如果没去掉会不会有影响呀？
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1楼 2015-07-25 09:16:06
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果要用载体的元件就把自己序列的启动子终止子去掉，如果要用自己的启动子终止子，就把自己的序列插入到载体的多克隆位点去，不用载体的元件。
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2楼2015-07-25 13:27:21
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99蜗牛99

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-07-25 13:27:21
如果要用载体的元件就把自己序列的启动子终止子去掉，如果要用自己的启动子终止子，就把自己的序列插入到载体的多克隆位点去，不用载体的元件。

如果目的基因没有去掉，本身载体上也有启动子终止子呢，翻译出来的蛋白有活性吗
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3楼2015-07-25 14:04:33
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-25 22:17:52
99蜗牛99: 金币+2, 谢谢。。最近没登录，所以评论晚了，新虫还请多指导~ 2015-08-13 19:46:03
引用回帖:
3楼: Originally posted by 99蜗牛99 at 2015-07-25 14:04:33
如果目的基因没有去掉，本身载体上也有启动子终止子呢，翻译出来的蛋白有活性吗...

如果这样能翻译出蛋白，只要阅读框正确，理论上翻出的蛋白是有活性的。但简单的事为什么要搞复杂呢，而且如果两套元件有干扰，不能正常表达，还得重来。
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4楼2015-07-25 16:36:30
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tupokewang

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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99蜗牛99: 金币+3, 谢谢。。最近没登录，所以评论晚了，新虫还请多指导~ 2015-08-13 19:46:15
我认为没有太大影响，ORF正确就行，但是如果载体上启动子需要诱导物才能启动基因的表达的话，鉴于后序实验，建议用载体上的启动子，这样容易控制基因的表达。。
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我相信我就是我，我相信明天。
5楼2015-07-28 11:02:57
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