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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » 对于环境样本高通量测序的时候的一些问题
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fengliwt

新虫 (初入文坛)

[交流] 对于环境样本高通量测序的时候的一些问题

新手，对于提出的环境样本，总DNA进行多样性鉴定，要做高通量测序，想知道：引物是怎么选定的，目的片段的长度有没有限定，引物接头是什么意思，还有下面这句话怎么翻译
preserve the quantitative composition of the template
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微生物多样性 高通量测序

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1楼 2015-07-07 18:19:33
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happy6

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引物的选定，一般的公司很多是参考文献的，有些进行了一些优化，对测序公司而言，常规的测序项目，引物都是已经确定好的，而且引物都是加上了接头的。接头序列包含了测序引物序列。目的片段的长度是要根据选择的测序平台定的。如果目的片段过长，两端测序读长较短的话，测不通PCR片段。供参考。好运！
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8楼2015-07-08 15:16:48
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我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
额，是自己先pcr一下，然后送去公司，公司还会再进行pcr纯化的，所以你初步（做细菌的话）就用16Sr RNA做吧(*^__^*)
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2楼2015-07-07 20:20:50
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fengliwt

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 我是鱼豆腐 at 2015-07-07 20:20:50
额，是自己先pcr一下，然后送去公司，公司还会再进行pcr纯化的，所以你初步（做细菌的话）就用16Sr RNA做吧(*^__^*)

是pcr原液吗，还有，目的片段大小有没有要求？多长合适？

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-07-07 20:54:14
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he龙行天下

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
公司的话，一般你只要提供样品或者DNA就行了，引物公司都有的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2015-07-07 23:37:50
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